In our study, a systematic development of a new large-scale sperm cryopreservation protocol was carried out in northern pike (Esox lucius). The effect of 2 sugar based (glucose and trehalose) extenders, 3 dilution ratios (1:3, 1:9 and 1:19) 2 vol straws (0.5 and 5 mL) and a 10 mL cryotube, 2 different cryopreservation methods (Polystyrene box-P. box and Controlled Rate Freezer-CRF), as well as 3 different thawing periods (3, 3.5 and 4 min) were investigated on the motility of thawed sperm. The glucose based extender showed significantly higher pMOT (1:3-18 ± 16%, 1:9-20 ± 13%, 1:19-16 ± 12%) at all dilution ratios than in the trehalose based extender (1:3-0.3 ± 1%, 1:9-1±1%, 1:19-4±2%). A similar tendency was recorded in VCL and STR at a ratio 1:3 and 1:9. No significant difference was measured in sperm movement between the P. box and CRF using the 0.5 mL straw. Similarly no significant difference was observed in all motility parameters with 10 mL cryotube frozen in CRF at a ratio 1:3-1:19. An effective and short thawing period (3 min) was experimentally specified for the 10 mL cryotube cryopreserved in the CRF. In all large-scale cryopreservation methods, high pMOT (straw CRF: 57 ± 10%, straw P. box: 50 ± 9%, cryotube CRF: 41 ± 10%), and STR were measured, and no significant difference was recorded in all motility parameters. Our results demonstrate the effectiveness of our newly developed extender and the applicability of 3 different large-scale cryopreservation methods in pike sperm. Our protocols could be new prospective candidates for future exploitation in hatchery practice.

中文翻译：

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北梭鱼（Esox lucius）大规模精子冷冻保存系统开发与优化

在我们的研究中，在北梭鱼（Esox lucius）中系统开发了一种新的大规模精子冷冻保存方案。2 种糖基（葡萄糖和海藻糖）增量剂、3 种稀释比（1:3、1:9 和 1:19）2 体积吸管（0.5 和 5 毫升）和 10 毫升冷冻管、2 种不同的冷冻保存方法（聚苯乙烯）的效果box-P.box 和 Controlled Rate Freezer-CRF）以及 3 个不同的解冻周期（3、3.5 和 4 分钟）对解冻精子的运动性进行了研究。与基于海藻糖的增量剂 (1:3) 相比，基于葡萄糖的增量剂在所有稀释比下均显示出显着更高的 pMOT（1:3-18 ± 16%、1:9-20 ± 13%、1:19-16 ± 12%） -0.3 ± 1%、1:9-1±1%、1:19-4±2%）。在 VCL 和 STR 中以 1:3 和 1:9 的比例记录了类似的趋势。P 之间的精子运动没有测量到显着差异。盒和 CRF 使用 0.5 毫升吸管。同样，在 CRF 中以 1:3-1:19 的比例冷冻 10 mL 冷冻管时，所有运动参数均未观察到显着差异。实验规定了冷冻保存在 CRF 中的 10 mL 冷冻管的有效和短解冻期（3 分钟）。在所有大规模冷冻保存方法中，测量了高pMOT（秸秆CRF：57±10%，秸秆P.box：50±9%，cryotube CRF：41±10%）和STR，未记录到显着差异所有运动参数。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。同样，在 CRF 中以 1:3-1:19 的比例冷冻 10 mL 冷冻管时，所有运动参数均未观察到显着差异。实验规定了冷冻保存在 CRF 中的 10 mL 冷冻管的有效和短解冻期（3 分钟）。在所有大规模冷冻保存方法中，测量了高pMOT（秸秆CRF：57±10%，秸秆P.box：50±9%，cryotube CRF：41±10%）和STR，未记录到显着差异所有运动参数。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。同样，在 CRF 中以 1:3-1:19 的比例冷冻 10 mL 冷冻管时，所有运动参数均未观察到显着差异。实验规定了冷冻保存在 CRF 中的 10 mL 冷冻管的有效和短解冻期（3 分钟）。在所有大规模冷冻保存方法中，测量了高pMOT（秸秆CRF：57±10%，秸秆P.box：50±9%，cryotube CRF：41±10%）和STR，未记录到显着差异所有运动参数。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。实验规定了冷冻保存在 CRF 中的 10 mL 冷冻管的有效和短解冻期（3 分钟）。在所有大规模冷冻保存方法中，测量了高pMOT（秸秆CRF：57±10%，秸秆P.box：50±9%，cryotube CRF：41±10%）和STR，未记录到显着差异所有运动参数。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。实验规定了冷冻保存在 CRF 中的 10 mL 冷冻管的有效和短解冻期（3 分钟）。在所有大规模冷冻保存方法中，测量了高pMOT（秸秆CRF：57±10%，秸秆P.box：50±9%，cryotube CRF：41±10%）和STR，未记录到显着差异所有运动参数。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。并且所有运动参数均未记录到显着差异。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。并且所有运动参数均未记录到显着差异。我们的结果证明了我们新开发的稀释剂的有效性以及 3 种不同的大规模冷冻保存方法在梭鱼精子中的适用性。我们的协议可能是孵化场实践中未来开发的新潜在候选者。