The maternal-fetal interface possesses innate immune strategies to protect against infections. We previously reported that prior viral infection of human fetal membranes (FMs) in vitro and mouse FMs in vivo sensitized the tissue to low dose bacterial LPS leading to augmented inflammation. The objective of this study was to examine FM production of type I interferons (IFNs) and IFN-stimulated genes (ISGs) in the context of this polymicrobial model. Human FM explants and pregnant C57BL/6 mice were treated with or without low dose LPS following exposure to media or the γ-herpes virus, MHV-68. FM RNA was analyzed by qRT-PCR for type I IFNs, ISGs, upstream signaling, and MHV-68 open reading frames (ORFs). Pre-exposure to MHV-68 followed by LPS treatment inhibited the ability of LPS to induce human FM type I IFNs (IFNA, IFNB); ISGs (OAS, MxA, APOBEC3G) and upstream signaling mediators (RIG-I, TBK-1). Signaling mediators IRF-3 and IRF-7 were also reduced. In mouse FMs, pre-exposure to MHV-68 followed by LPS treatment reduced the ability of LPS to upregulate Ifna, Ifnb, Mxa, Irf7, and also reduced Irf3. MHV-68 infection of FMs induced ORF45 which targets IRF-7, and this was further augmented in response to a combination of MHV-68 and LPS. Together, these findings indicate that a viral infection blunts FM type I IFN production and signaling in response to LPS leading to a suppressed ISG response. Our studies suggest that a viral infection inhibits this protective FM response by negatively regulating IRF-7 through ORF45, leaving the maternal-fetal interface vulnerable to further viral attack.

中文翻译：

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病毒感染抑制由细菌 LPS 触发的人胎膜 I 型干扰素反应。

母胎界面具有先天免疫策略来防止感染。我们之前曾报道过体外人胎膜 (FM) 和体内小鼠 FM 的先前病毒感染使组织对低剂量细菌 LPS 敏感，从而导致炎症加剧。本研究的目的是在这种多微生物模型的背景下检查 I 型干扰素 (IFN) 和 IFN 刺激基因 (ISG) 的 FM 生产。人类 FM 外植体和怀孕的 C57BL/6 小鼠在暴露于培养基或 γ-疱疹病毒 MHV-68 后，用或不用低剂量 LPS 进行治疗。FM RNA 通过 qRT-PCR 分析 I 型干扰素、ISG、上游信号和 MHV-68 开放阅读框 (ORF)。预暴露于 MHV-68 后进行 LPS 处理抑制了 LPS 诱导人类 FM I 型 IFN（IFNA、IFNB）的能力；ISG（OAS、MxA、APOBEC3G) 和上游信号介质 (RIG-I, TBK-1)。信号介质 IRF-3 和 IRF-7 也减少了。在小鼠 FM 中，预先暴露于 MHV-68 后进行 LPS 处理降低了 LPS 上调 Ifna、Ifnb、Mxa、Irf7 的能力，并降低了 Irf3。FMs 的 MHV-68 感染诱导 ORF45，其靶向 IRF-7，并且这进一步增强以响应 MHV-68 和 LPS 的组合。总之，这些发现表明病毒感染减弱了 FM I 型 IFN 产生和信号传导以响应 LPS，从而导致抑制 ISG 反应。我们的研究表明，病毒感染通过 ORF45 负调节 IRF-7 来抑制这种保护性 FM 反应，使母胎界面容易受到进一步的病毒攻击。信号介质 IRF-3 和 IRF-7 也减少了。在小鼠 FM 中，预先暴露于 MHV-68 后进行 LPS 处理降低了 LPS 上调 Ifna、Ifnb、Mxa、Irf7 的能力，并降低了 Irf3。FMs 的 MHV-68 感染诱导 ORF45，其靶向 IRF-7，并且这进一步增强以响应 MHV-68 和 LPS 的组合。总之，这些发现表明病毒感染减弱了 FM I 型 IFN 产生和信号传导以响应 LPS，从而导致抑制 ISG 反应。我们的研究表明，病毒感染通过 ORF45 负调节 IRF-7 来抑制这种保护性 FM 反应，使母胎界面容易受到进一步的病毒攻击。信号介质 IRF-3 和 IRF-7 也减少了。在小鼠 FM 中，预先暴露于 MHV-68 后进行 LPS 处理降低了 LPS 上调 Ifna、Ifnb、Mxa、Irf7 的能力，并降低了 Irf3。FMs 的 MHV-68 感染诱导 ORF45，其靶向 IRF-7，并且这进一步增强以响应 MHV-68 和 LPS 的组合。总之，这些发现表明病毒感染减弱了 FM I 型 IFN 产生和信号传导以响应 LPS，从而导致抑制 ISG 反应。我们的研究表明，病毒感染通过 ORF45 负调节 IRF-7 来抑制这种保护性 FM 反应，使母胎界面容易受到进一步的病毒攻击。FMs 的 MHV-68 感染诱导 ORF45，其靶向 IRF-7，并且这进一步增强以响应 MHV-68 和 LPS 的组合。总之，这些发现表明病毒感染减弱了 FM I 型 IFN 产生和信号传导以响应 LPS，从而导致抑制 ISG 反应。我们的研究表明，病毒感染通过 ORF45 负调节 IRF-7 来抑制这种保护性 FM 反应，使母胎界面容易受到进一步的病毒攻击。FMs 的 MHV-68 感染诱导 ORF45，其靶向 IRF-7，并且这进一步增强以响应 MHV-68 和 LPS 的组合。总之，这些发现表明病毒感染减弱了 FM I 型 IFN 产生和信号传导以响应 LPS，从而导致抑制 ISG 反应。我们的研究表明，病毒感染通过 ORF45 负调节 IRF-7 来抑制这种保护性 FM 反应，使母胎界面容易受到进一步的病毒攻击。