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Crio-fixation of Pachytene Cells
Microscopy and Microanalysis ( IF 2.9 ) Pub Date : 2020-04-28 , DOI: 10.1017/s1431927620000458
R. Ortiz-Hernandez , G. H. Vázquez-Nin , O. Echeverría-Martínez , C. Höög , A. Hernández-Hernández

Genetic variability in organisms with sexual reproduction is produced by a complex mechanism of cell division of the germ line cells known as meiosis. During meiosis, homologous chromosomes pair and exchange genetic material (meiotic recombination), process that is essential to complete the meiotic division and to produce variability. Homologous chromosome pairing is mediated by the synaptonemal complex (SC). The SC is a proteinaceous structure composed of two lateral elements (LEs) and a central region (CR). Any defect in SC structure impairs meiotic recombination leading to blockage of the cell division process and infertility1. The SC has been observed since the introduction of the electron microscope (EM) in the biological field and it has been reported to be present in almost all the organisms with sexual reproduction, conserving a very similar structure and organisation along the different species2,3. The classic approach to study the SC structure is to chemically fixate the sexual tissues (gonads), dehydrate and embedded them in plastic resins that provide a support for sample sectioning and observation under the EM. However, chemical fixation followed by dehydration is well known to produce artefacts in the structure of many biological samples. Recently, we have combined fluorescence activated cell sorting of cells with SCs with high-pressure freezing and freeze- substitution and have found that the structure of the CR looks different from that observed in chemically fixated samples. These data have prompted us to analyse the organization of the CR components under cryo-processing.

中文翻译:

粗线期细胞的 Crio 固定

有性生殖生物体的遗传变异性是由一种称为减数分裂的生殖系细胞分裂的复杂机制产生的。在减数分裂过程中,同源染色体配对和交换遗传物质(减数分裂重组),这是完成减数分裂和产生变异所必需的过程。同源染色体配对由联会复合体 (SC) 介导。SC 是由两个横向元件 (LE) 和一个中心区域 (CR) 组成的蛋白质结构。SC 结构中的任何缺陷都会损害减数分裂重组,导致细胞分裂过程受阻和不育1。自从在生物领域引入电子显微镜 (EM) 以来就已经观察到 SC,据报道它几乎存在于所有有性生殖的生物体中,沿不同物种保存非常相似的结构和组织2,3。研究 SC 结构的经典方法是化学固定性组织(性腺),使其脱水并嵌入塑料树脂中,为 EM 下的样品切片和观察提供支持。然而,众所周知,化学固定后脱水会在许多生物样品的结构中产生伪影。最近,我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。研究 SC 结构的经典方法是化学固定性组织(性腺),使其脱水并嵌入塑料树脂中,为 EM 下的样品切片和观察提供支持。然而,众所周知,化学固定后脱水会在许多生物样品的结构中产生伪影。最近,我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。研究 SC 结构的经典方法是化学固定性组织(性腺),使其脱水并嵌入塑料树脂中,为 EM 下的样品切片和观察提供支持。然而,众所周知,化学固定后脱水会在许多生物样品的结构中产生伪影。最近,我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。脱水并将它们嵌入塑料树脂中,为在 EM 下的样品切片和观察提供支持。然而,众所周知,化学固定后脱水会在许多生物样品的结构中产生伪影。最近,我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。脱水并将它们嵌入塑料树脂中,为在 EM 下的样品切片和观察提供支持。然而,众所周知,化学固定后脱水会在许多生物样品的结构中产生伪影。最近,我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。我们将荧光激活细胞分选与 SCs 与高压冷冻和冷冻替代相结合,发现 CR 的结构看起来与在化学固定样品中观察到的不同。这些数据促使我们分析低温处理下 CR 组件的组织。
更新日期:2020-04-28
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