The basic helix-loop-helix (bHLH) proteins belong to a superfamily of transcription factors. Recent research has shown that the bHLH transcription factor DevR is involved in both sexual and asexual development as well as conidial melanin production in Aspergillus species. Our previous research also found that DevR significantly influences polysaccharide metabolism in Aspergillus oryzae. In this study, to further explore the function of DevR, its interaction proteins were screened by a yeast two-hybrid assay. An A. oryzae cDNA library was transformed into the Y187 strain by using the SMART technique and the homologous recombination method, and then hybridized with a constructed DevR bait plasmid introducing strain to obtain positive clones. Through sequencing analysis, the potential interaction proteins of DevR were determined. Among them, an AO090701000363 gene-encoding protein (named DipA), which was predicted to be a basic leucine zipper (bZIP) transcription factor, was a possible candidate. Phenotypic analysis indicated that overexpression of the AodipA may significantly suppress growth of the strain. Additionally, although no obvious change in the growth rate was found, the deletion of AodipA resulted in thicker hyphae morphology relative to the control. Comparative proteomic analysis further indicated that DipA was potentially involved in the regulation of cell wall integrity, carbon utilization, acetate catabolic process and other biological processes. Partial similarity of the phenotype to that of DevR suggested a correlation between them and implied that the DipA has a function partially similar to that of DevR.

中文翻译：

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米曲霉中 DevR 相互作用蛋白的鉴定和表征

基本的螺旋-环-螺旋 (bHLH) 蛋白属于转录因子超家族。最近的研究表明，bHLH 转录因子 DevR 参与曲霉属物种的有性和无性发育以及分生孢子黑色素的产生。我们之前的研究还发现，DevR 显着影响米曲霉的多糖代谢。在本研究中，为了进一步探索 DevR 的功能，通过酵母双杂交试验筛选了其相互作用蛋白。采用SMART技术和同源重组方法将米曲霉cDNA文库转化到Y187菌株中，然后与构建的DevR诱饵质粒导入菌株杂交获得阳性克隆。通过测序分析，确定了DevR潜在的相互作用蛋白。他们之中，预测为碱性亮氨酸拉链 (bZIP) 转录因子的 AO090701000363 基因编码蛋白（命名为 DipA）是可能的候选者。表型分析表明，AodipA 的过表达可能会显着抑制菌株的生长。此外，虽然没有发现生长速率的明显变化，但 AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。被预测为碱性亮氨酸拉链 (bZIP) 转录因子的 是一个可能的候选者。表型分析表明，AodipA 的过表达可能会显着抑制菌株的生长。此外，虽然没有发现生长速率的明显变化，但 AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。被预测为碱性亮氨酸拉链 (bZIP) 转录因子的 是一个可能的候选者。表型分析表明，AodipA 的过表达可能会显着抑制菌株的生长。此外，虽然没有发现生长速率的明显变化，但 AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。表型分析表明，AodipA 的过表达可能会显着抑制菌株的生长。此外，虽然没有发现生长速率的明显变化，但 AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。表型分析表明，AodipA 的过表达可能会显着抑制菌株的生长。此外，虽然没有发现生长速率的明显变化，但 AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。AodipA 的缺失导致相对于对照更厚的菌丝形态。比较蛋白质组学分析进一步表明，DipA 可能参与调节细胞壁完整性、碳利用、乙酸分解代谢过程和其他生物过程。表型与 DevR 的部分相似表明它们之间存在相关性，并暗示 DipA 具有与 DevR 部分相似的功能。