BACKGROUND Alopecia is a highly prevalent disease characterizing by the loss of hair. Dermal papilla (DP) cells are the inducer of hair follicle regeneration, and in vitro three-dimensional (3D) culturing DP cells have been proven to induce hair follicle regeneration. However, the molecular mechanisms behind the regulation of 3D culturing DP cells remain unclear. METHODS 3D-cultivated DP cells were used as in vitro cell model. DP sphere xenograft to nude mice was performed for in vivo study of hair follicle regeneration. qRT-PCR, Western blotting, and immunofluorescence were used for detecting the level of XIST, miR-424 and Hedgehog pathway-related proteins, respectively. H&E staining was used to examine hair neogenesis. Cell viability, proliferation and ALP activity were measured by MTT, CCK-8 and ELISA assays, respectively. Luciferase assays were used for studying molecular regulation between XIST, miR-424 and Shh 3'UTR. RESULTS XIST and Shh were up-regulated, and miR-424 was down-regulated in 3D DP cells. Molecular regulation studies suggested that XIST sponged miR-424 to promote Shh expression. Knockdown of XIST suppressed DP cell activity, cell proliferation, ALP activity and the expression of other DP markers by sponging miR-424. Knockdown of XIST suppressed Shh mediated hedgehog signaling by targeting miR-424. Moreover, the knockdown of XIST inhibited DP sphere induced in vivo hair follicle regeneration and hair development. CONCLUSION XIST sponges miR-424 to promote Shh expression, thereby activating hedgehog signaling and facilitating DP mediated hair follicle regeneration.

中文翻译：

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LncRNA-XIST 通过靶向 miR-424 激活刺猬信号促进真皮乳头诱导的毛囊再生。

背景脱发是一种高度流行的疾病，其特征在于脱发。真皮乳头 (DP) 细胞是毛囊再生的诱导剂，体外三维 (3D) 培养 DP 细胞已被证明可诱导毛囊再生。然而，调控 3D 培养 DP 细胞背后的分子机制仍不清楚。方法 3D 培养的 DP 细胞用作体外细胞模型。对裸鼠进行 DP 球异种移植，用于毛囊再生的体内研究。qRT-PCR、Western印迹和免疫荧光分别用于检测XIST、miR-424和Hedgehog通路相关蛋白的水平。H&E 染色用于检查毛发新生。分别通过 MTT、CCK-8 和 ELISA 测定法测量细胞活力、增殖和 ALP 活性。荧光素酶测定用于研究 XIST、miR-424 和 Shh 3'UTR 之间的分子调控。结果 XIST和Shh在3D DP细胞中上调，而miR-424下调。分子调控研究表明 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达。XIST 的敲低通过海绵 miR-424 抑制了 DP 细胞活性、细胞增殖、ALP 活性和其他 DP 标志物的表达。XIST 的敲除通过靶向 miR-424 抑制了 Shh 介导的刺猬信号。此外，XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。UTR。结果 XIST和Shh在3D DP细胞中上调，而miR-424下调。分子调控研究表明 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达。XIST 的敲低通过海绵 miR-424 抑制了 DP 细胞活性、细胞增殖、ALP 活性和其他 DP 标志物的表达。XIST 的敲除通过靶向 miR-424 抑制了 Shh 介导的刺猬信号。此外，XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。UTR。结果 XIST和Shh在3D DP细胞中上调，而miR-424下调。分子调控研究表明 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达。XIST 的敲低通过海绵 miR-424 抑制了 DP 细胞活性、细胞增殖、ALP 活性和其他 DP 标志物的表达。XIST 的敲除通过靶向 miR-424 抑制了 Shh 介导的刺猬信号。此外，XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。分子调控研究表明 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达。XIST 的敲低通过海绵 miR-424 抑制了 DP 细胞活性、细胞增殖、ALP 活性和其他 DP 标志物的表达。XIST 的敲除通过靶向 miR-424 抑制了 Shh 介导的刺猬信号。此外，XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。分子调控研究表明 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达。XIST 的敲低通过海绵 miR-424 抑制了 DP 细胞活性、细胞增殖、ALP 活性和其他 DP 标志物的表达。XIST 的敲除通过靶向 miR-424 抑制了 Shh 介导的刺猬信号。此外，XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。XIST 的敲低抑制了 DP 球体诱导的体内毛囊再生和头发发育。结论 XIST 吸收 miR-424 以促进 Shh 表达，从而激活刺猬信号并促进 DP 介导的毛囊再生。