Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is one of the most prevalent cancers worldwide. Due to its high morbidity and mortality rates, it is urgent to find a molecular target that contributes to esophageal carcinogenesis and progression. In this research, we aimed to investigate the functions of Latent transforming growth factor β binding protein 1(LTBP1) in ESCC progression and elucidate the underlying mechanisms. The tandem mass tag-based quantitative proteomic approach was applied to screen the differentially expressed proteins (DEPs) between 3 cases of ESCC tumor samples and paired normal tissues. Then the DEPs were validated in human ESCC tissues using western blot assays and GEPIA database respectively. The expression level of LTBP1 was detected in 152 cases of ESCC tissues and paired normal tissues. Loss-of-function assays were performed to detect the function of LTBP1 in vivo and in vitro. Immunofluorescence and Western blot assays were used to detect the expression of apoptosis, epithelial–mesenchymal transition (EMT) and cancer-associated fibroblasts (CAFs) markers. A total of 39 proteins were screened to be up-regulated (ratio > 2.0) in all three ESCC tissues. The results of immunohistochemistry assays indicated that the expression level of LTBP1 was higher in ESCC tissues than that in paired normal tissues (p < 0.001). Overexpression of LTBP1 was positively associated with lymphatic metastasis in ESCC (p = 0.002). Down-regulation of LTBP1 inhibited the invasion and migration as well as metastatic abilities in vitro and in vivo. It was also observed the down-regulation of LTBP1 not only decreased the mesenchymal phenotypes but also inhibited TGFβ-induced EMT in ESCC cells. We further found that down-regulation of LTBP1 enhanced ESCC cells’ sensitivity to 5-FU treatment. Inhibition of LTBP1 expression could also attenuate induction of CAFs transformation and restrain fibroblast express fibronectin (FN1) in ESCC cells. Overexpression of LTBP1 was associated with lymph node metastasis in ESCC. Our results indicated that LTBP1 not only increased the malignant behaviors of ESCC cells but also induced EMT and CAFs transformation. Our studies suggested an oncogenic role of LTBP1 in ESCC progression and it may serve as a potential therapeutic target for ESCC patients.

中文翻译：

---

LTBP1通过上皮-间质转化和癌症相关成纤维细胞转化促进食管鳞状细胞癌进展。

食管鳞状细胞癌（ESCC）是全球最常见的癌症之一。由于其高发病率和死亡率，迫切需要找到有助于食管癌发生和进展的分子靶点。在本研究中，我们旨在研究潜在转化生长因子 β 结合蛋白 1（LTBP1）在 ESCC 进展中的功能并阐明其潜在机制。应用基于串联质量标签的定量蛋白质组学方法筛选 3 例 ESCC 肿瘤样本和配对正常组织之间的差异表达蛋白 (DEP)。然后分别使用蛋白质印迹分析和 GEPIA 数据库在人 ESCC 组织中验证 DEP。在 152 例 ESCC 组织和配对的正常组织中检测到 LTBP1 的表达水平。进行功能丧失测定以检测 LTBP1 在 体内 和 体外 的功能。免疫荧光和蛋白质印迹分析用于检测细胞凋亡、上皮间质转化 (EMT) 和癌症相关成纤维细胞 (CAF) 标志物的表达。在所有三种 ESCC 组织中，共有 39 种蛋白质被筛选为上调（比率 > 2.0）。免疫组化分析结果表明，LTBP1 在ESCC 组织中的表达水平高于成对的正常组织（p < 0.001）。LTBP1 的过表达与 ESCC 的淋巴转移呈正相关（p = 0.002）。LTBP1 的下调抑制了体外和体内的侵袭和迁移以及转移能力。还观察到 LTBP1 的下调不仅降低了间充质表型，而且还抑制了 ESCC 细胞中 TGFβ 诱导的 EMT。我们进一步发现 LTBP1 的下调增强了 ESCC 细胞对 5-FU 治疗的敏感性。LTBP1 表达的抑制也可以减弱 CAFs 转化的诱导并抑制 ESCC 细胞中成纤维细胞表达纤连蛋白 (FN1)。LTBP1 的过表达与 ESCC 的淋巴结转移有关。我们的研究结果表明，LTBP1 不仅增加了 ESCC 细胞的恶性行为，而且还诱导了 EMT 和 CAFs 转化。我们的研究表明 LTBP1 在 ESCC 进展中的致癌作用，它可能作为 ESCC 患者的潜在治疗靶点。我们进一步发现 LTBP1 的下调增强了 ESCC 细胞对 5-FU 治疗的敏感性。LTBP1 表达的抑制也可以减弱 CAFs 转化的诱导并抑制 ESCC 细胞中成纤维细胞表达纤连蛋白 (FN1)。LTBP1 的过表达与 ESCC 的淋巴结转移有关。我们的研究结果表明，LTBP1 不仅增加了 ESCC 细胞的恶性行为，而且还诱导了 EMT 和 CAFs 转化。我们的研究表明 LTBP1 在 ESCC 进展中的致癌作用，它可能作为 ESCC 患者的潜在治疗靶点。我们进一步发现 LTBP1 的下调增强了 ESCC 细胞对 5-FU 治疗的敏感性。LTBP1 表达的抑制也可以减弱 CAFs 转化的诱导并抑制 ESCC 细胞中成纤维细胞表达纤连蛋白 (FN1)。LTBP1 的过表达与 ESCC 的淋巴结转移有关。我们的研究结果表明，LTBP1 不仅增加了 ESCC 细胞的恶性行为，而且还诱导了 EMT 和 CAFs 转化。我们的研究表明 LTBP1 在 ESCC 进展中的致癌作用，它可能作为 ESCC 患者的潜在治疗靶点。我们的研究结果表明，LTBP1 不仅增加了 ESCC 细胞的恶性行为，而且还诱导了 EMT 和 CAFs 转化。我们的研究表明 LTBP1 在 ESCC 进展中的致癌作用，它可能作为 ESCC 患者的潜在治疗靶点。我们的研究结果表明，LTBP1 不仅增加了 ESCC 细胞的恶性行为，而且还诱导了 EMT 和 CAFs 转化。我们的研究表明 LTBP1 在 ESCC 进展中的致癌作用，它可能作为 ESCC 患者的潜在治疗靶点。