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CRISPR/Cas-directed programmable assembly of multi-enzyme complexes
Chemical Communications ( IF 6.164 ) Pub Date : 2020/03/25 , DOI: 10.1039/d0cc01174f
Samuel Lim; Jiwoo Kim; Yujin Kim; Dawei Xu; Douglas S. Clark

We describe a versatile CRISPR/Cas-based strategy to construct multi-enzyme complexes scaffolded on a DNA template in programmable patterns. Catalytically inactive dCas9 nuclease was used in combination with SpyCatcher-SpyTag chemistry to assemble enzymes in a highly modular fashion. Five enzymes comprising the violacein biosynthesis pathway were precisely organized in nanometer proximity; a notable increase in violacein production demonstrated the benefits of scaffolding.
更新日期:2020-03-26

 

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