Specificity protein 1 (Sp1) is an important transcription factor implicated in numerous cellular processes. However, whether Sp1 is involved in the regulation of RNA polymerase Ⅲ (Pol Ⅲ)-directed gene transcription in human cells remains unknown. Here, we first show that filamin A (FLNA) represses Sp1 expression as well as expression of TFIIB-related factor 1 (BRF1) and general transcription factor Ⅲ C subunit 2(GTF3C2) in HeLa, 293T and SaOS2 cells lines stably expressing FLNA-silencing shRNAs. Both BRF1 promoter 4 (BRF1P4) and GTF3C2 promoter 2 (GTF3C2P2) contain putative Sp1-binding sites, suggesting that Sp1 affects Pol Ⅲ gene transcription by regulating BRF1 and GTF3C2 expression. We demonstrate that Sp1 knockdown inhibits Pol Ⅲ gene transcription, BRF1 and GTF3C2 expression, and the proliferation of 293T and HeLa cells, whereas Sp1 overexpression enhances these activities. We obtained a comparable result in a cell line in which both FLNA and Sp1 were depleted. These results indicate that Sp1 is involved in the regulation of Pol Ⅲ gene transcription independently of FLNA expression. Reporter gene assays showed that alteration of Sp1 expression affects BRF1P4 and GTF3C2P2 activation, suggesting that Sp1 modulates Pol Ⅲ-mediated gene transcription by controlling BRF1 and GTF3C2 gene expression. Further analysis revealed that Sp1 interacts with and thereby promotes the occupancies of TATA box-binding protein (TBP), TFIIAα and p300 at both BRF1P4 and GTF3C2P2. These findings indicate that Sp1 controls Pol Ⅲ-directed transcription and shed light on how Sp1 regulates cancer cell proliferation.

中文翻译：

---

转录因子Sp1通过控制人细胞中BRF1和GTF3C2的表达来调节RNA聚合酶Ⅲ基因的转录。

特异性蛋白 1 (Sp1) 是一种重要的转录因子，涉及许多细胞过程。然而，Sp1是否参与人类细胞中RNA聚合酶Ⅲ（PolⅢ）定向基因转录的调控仍不清楚。在这里，我们首先表明细丝蛋白 A (FLNA) 在稳定表达 FLNA-的 HeLa、293T 和 SaOS2 细胞系中抑制 Sp1 的表达以及 TFIIB 相关因子 1 (BRF1) 和一般转录因子 Ⅲ C 亚基 2 (GTF3C2) 的表达。沉默 shRNA。BRF1启动子4（BRF1P4）和GTF3C2启动子2（GTF3C2P2）均含有推测的Sp1结合位点，提示Sp1通过调节BRF1和GTF3C2的表达影响PolⅢ基因的转录。我们证明 Sp1 敲低抑制 Pol Ⅲ 基因转录、BRF1 和 GTF3C2 表达以及 293T 和 HeLa 细胞的增殖，而 Sp1 过表达增强了这些活动。我们在 FLNA 和 Sp1 都被耗尽的细胞系中获得了类似的结果。这些结果表明Sp1参与了Pol Ⅲ基因转录的调控，独立于FLNA的表达。报告基因检测显示Sp1表达的改变影响BRF1P4和GTF3C2P2的活化，表明Sp1通过控制BRF1和GTF3C2基因的表达来调节Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。我们在 FLNA 和 Sp1 都被耗尽的细胞系中获得了类似的结果。这些结果表明Sp1参与了Pol Ⅲ基因转录的调控，独立于FLNA的表达。报告基因检测显示Sp1表达的改变影响BRF1P4和GTF3C2P2的活化，表明Sp1通过控制BRF1和GTF3C2基因的表达来调节Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。我们在 FLNA 和 Sp1 都被耗尽的细胞系中获得了类似的结果。这些结果表明Sp1参与了Pol Ⅲ基因转录的调控，独立于FLNA的表达。报告基因检测显示Sp1表达的改变影响BRF1P4和GTF3C2P2的活化，表明Sp1通过控制BRF1和GTF3C2基因的表达来调节Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。这些结果表明Sp1参与了Pol Ⅲ基因转录的调控，独立于FLNA的表达。报告基因检测显示Sp1表达的改变影响BRF1P4和GTF3C2P2的活化，表明Sp1通过控制BRF1和GTF3C2基因的表达来调节Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。这些结果表明Sp1参与了Pol Ⅲ基因转录的调控，独立于FLNA的表达。报告基因检测显示Sp1表达的改变影响BRF1P4和GTF3C2P2的活化，表明Sp1通过控制BRF1和GTF3C2基因的表达来调节Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。表明 Sp1 通过控制 BRF1 和 GTF3C2 基因表达来调节 Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。表明 Sp1 通过控制 BRF1 和 GTF3C2 基因表达来调节 Pol Ⅲ介导的基因转录。进一步的分析表明，Sp1 与 BRF1P4 和 GTF3C2P2 上的 TATA 盒结合蛋白 (TBP)、TFIIAα 和 p300 相互作用，从而促进其占据。这些发现表明 Sp1 控制 Pol Ⅲ 定向的转录，并阐明了 Sp1 如何调节癌细胞增殖。