Purpose: Survival of CLL cells due to the presence of Bcl-2 and Mcl-1 has been established. Direct inhibition of Bcl-2 by venetoclax and indirect targeting of Mcl-1 with transcription inhibitors have been successful approaches for CLL. AMG-176 is a selective and direct antagonist of Mcl-1, which has shown efficacy in several hematologic malignancies; however, its effect on CLL is elusive. We evaluated biological and molecular effects of AMG-176 in primary CLL cells. Experimental Design: Using samples from patients ( n = 74) with CLL, we tested effects of AMG-176 on CLL and normal hematopoietic cell death and compared importance of CLL prognostic factors on this biological activity. We evaluated CLL cell apoptosis in the presence of stromal cells and identified cell death pathway including stabilization of Mcl-1 protein. Finally, we tested a couplet of AMG-176 and venetoclax in CLL lymphocytes. Results: AMG-176 incubations resulted in time- and dose-dependent CLL cell death. At 100 and 300 nmol/L, there was 30% and 45% cell death at 24 hours. These concentrations did not result in significant cell death in normal hematopoietic cells. Presence of stroma did not affect AMG-176–induced CLL cell death. IGHV unmutated status, high β2M and Mcl-1 protein levels resulted in slightly lower cell death. Mcl-1, but not Bcl-2 protein levels, in CLL cells increased with AMG-176. Low concentrations of venetoclax (1–30 nmol/L) were additive or synergistic with AMG-176. Conclusions: AMG-176 is active in inducing CLL cell death while sparing normal blood cells. Combination with low-dose venetoclax was additive or synergistic.

中文翻译：

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AMG-176 是一种 Mcl-1 拮抗剂，在慢性淋巴细胞白血病中显示出临床前疗效。

目的：已确定因 Bcl-2 和 Mcl-1 的存在而导致 CLL 细胞的存活。venetoclax 直接抑制 Bcl-2 和用转录抑制剂间接靶向 Mcl-1 已成为治疗 CLL 的成功方法。AMG-176 是 Mcl-1 的选择性和直接拮抗剂，已在多种血液系统恶性肿瘤中显示出疗效；然而，它对 CLL 的影响是难以捉摸的。我们评估了 AMG-176 在原代 CLL 细胞中的生物学和分子效应。实验设计：使用来自 CLL 患者 (n = 74) 的样本，我们测试了 AMG-176 对 CLL 和正常造血细胞死亡的影响，并比较了 CLL 预后因素对该生物活性的重要性。我们在基质细胞存在的情况下评估了 CLL 细胞凋亡，并确定了细胞死亡途径，包括 Mcl-1 蛋白的稳定化。最后，我们在 CLL 淋巴细胞中测试了一组 AMG-176 和 venetoclax。结果：AMG-176 孵育导致时间和剂量依赖性 CLL 细胞死亡。在 100 和 300 nmol/L 下，24 小时内有 30% 和 45% 的细胞死亡。这些浓度不会导致正常造血细胞中的显着细胞死亡。基质的存在不影响 AMG-176 诱导的 CLL 细胞死亡。IGHV 未突变状态、高 β2M 和 Mcl-1 蛋白水平导致细胞死亡略低。Mcl-1，但不是 Bcl-2 蛋白水平，在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。AMG-176 孵育导致时间和剂量依赖性 CLL 细胞死亡。在 100 和 300 nmol/L 下，24 小时内有 30% 和 45% 的细胞死亡。这些浓度不会导致正常造血细胞中的显着细胞死亡。基质的存在不影响 AMG-176 诱导的 CLL 细胞死亡。IGHV 未突变状态、高 β2M 和 Mcl-1 蛋白水平导致细胞死亡略低。Mcl-1，但不是 Bcl-2 蛋白水平，在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。AMG-176 孵育导致时间和剂量依赖性 CLL 细胞死亡。在 100 和 300 nmol/L 下，24 小时内有 30% 和 45% 的细胞死亡。这些浓度不会导致正常造血细胞中的显着细胞死亡。基质的存在不影响 AMG-176 诱导的 CLL 细胞死亡。IGHV 未突变状态、高 β2M 和 Mcl-1 蛋白水平导致细胞死亡略低。Mcl-1，但不是 Bcl-2 蛋白水平，在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。这些浓度不会导致正常造血细胞中的显着细胞死亡。基质的存在不影响 AMG-176 诱导的 CLL 细胞死亡。IGHV 未突变状态、高 β2M 和 Mcl-1 蛋白水平导致细胞死亡略低。Mcl-1，但不是 Bcl-2 蛋白水平，在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。这些浓度不会导致正常造血细胞中的显着细胞死亡。基质的存在不影响 AMG-176 诱导的 CLL 细胞死亡。IGHV 未突变状态、高 β2M 和 Mcl-1 蛋白水平导致细胞死亡略低。Mcl-1，但不是 Bcl-2 蛋白水平，在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。在 CLL 细胞中随 AMG-176 增加。低浓度的 venetoclax (1–30 nmol/L) 与 AMG-176 具有相加或协同作用。结论：AMG-176 在诱导 CLL 细胞死亡同时保留正常血细胞方面具有活性。与低剂量 venetoclax 的组合是相加的或协同的。