Background Rapid progression contributes to treatment failure in anaplastic thyroid carcinoma (ATC) patients. In a preliminary study, we demonstrated that some hematopoietic factors may be involved in the progression of ATC. The adaptor protein LNK, which is a negative regulator of hematopoietic cytokine signalling, has been studied extensively in malignant hematopoietic cells. However, there are few studies on LNK in solid tumours. Methods Real-time PCR, immunohistochemistry (IHC) and western blot analysis of LNK were performed on ATC cells, differentiated thyroid cancer (DTC) cells and normal thyroid cells. In vitro assays (including pull-down, liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), co-IP, MTT and colony formation) were performed to validate the effect of LNK on ATC progression and elucidate the molecular mechanisms. Results Compared with DTC cells and normal thyroid cells, ATC cells exhibit overexpression of LNK. In addition, LNK overexpression results in increased proliferation of ATC cells. Conversely, LNK knockdown significantly suppresses ATC cell proliferation. LC-MS identified the 14-3-3 ε/γ protein as a LNK binding partner. Finally, the results indicate that LNK overexpression significantly enhances the anti-apoptotic ability of ATC cells via the Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL pathway and that the oncogenic effect of LNK largely depends on 14-3-3 ε/γ binding. Conclusions The present study elucidated the important role of LNK in the growth of ATC opposite to its behaviour in the hematopoietic system and indicates that LNK is a potential target for the treatment of ATC.

中文翻译：

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衔接蛋白 LNK 通过 14-3-3 ε/γ 结合促进间变性甲状腺癌细胞生长。

背景 快速进展导致间变性甲状腺癌 (ATC) 患者的治疗失败。在一项初步研究中，我们证明了一些造血因素可能与 ATC 的进展有关。衔接蛋白 LNK 是造血细胞因子信号传导的负调节因子，已在恶性造血细胞中得到广泛研究。然而，关于实体瘤中 LNK 的研究很少。方法对ATC细胞、分化的甲状腺癌（DTC）细胞和正常甲状腺细胞进行LNK的实时荧光定量PCR、免疫组化（IHC）和蛋白质印迹分析。进行体外测定（包括下拉、液相色谱-质谱 (LC-MS)、co-IP、MTT 和集落形成）以验证 LNK 对 ATC 进展的影响并阐明分子机制。结果与DTC细胞和正常甲状腺细胞相比，ATC细胞表现出LNK过表达。此外，LNK 过表达导致 ATC 细胞增殖增加。相反，LNK 敲低显着抑制 ATC 细胞增殖。LC-MS 将 14-3-3 ε/γ 蛋白鉴定为 LNK 结合伙伴。最后，结果表明，LNK 过表达通过 Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL 途径显着增强 ATC 细胞的抗凋亡能力，并且 LNK 的致癌作用很大程度上取决于 14-3-3 ε/γ捆绑。结论 本研究阐明了 LNK 在 ATC 生长中的重要作用与其在造血系统中的行为相反，表明 LNK 是治疗 ATC 的潜在靶点。此外，LNK 过表达导致 ATC 细胞增殖增加。相反，LNK 敲低显着抑制 ATC 细胞增殖。LC-MS 将 14-3-3 ε/γ 蛋白鉴定为 LNK 结合伙伴。最后，结果表明，LNK 过表达通过 Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL 途径显着增强 ATC 细胞的抗凋亡能力，并且 LNK 的致癌作用很大程度上取决于 14-3-3 ε/γ捆绑。结论 本研究阐明了 LNK 在 ATC 生长中的重要作用与其在造血系统中的行为相反，表明 LNK 是治疗 ATC 的潜在靶点。此外，LNK 过表达导致 ATC 细胞增殖增加。相反，LNK 敲低显着抑制 ATC 细胞增殖。LC-MS 将 14-3-3 ε/γ 蛋白鉴定为 LNK 结合伙伴。最后，结果表明，LNK 过表达通过 Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL 途径显着增强 ATC 细胞的抗凋亡能力，并且 LNK 的致癌作用很大程度上取决于 14-3-3 ε/γ捆绑。结论 本研究阐明了 LNK 在 ATC 生长中的重要作用与其在造血系统中的行为相反，表明 LNK 是治疗 ATC 的潜在靶点。LC-MS 将 14-3-3 ε/γ 蛋白鉴定为 LNK 结合伙伴。最后，结果表明，LNK 过表达通过 Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL 途径显着增强 ATC 细胞的抗凋亡能力，并且 LNK 的致癌作用很大程度上取决于 14-3-3 ε/γ捆绑。结论 本研究阐明了 LNK 在 ATC 生长中的重要作用与其在造血系统中的行为相反，表明 LNK 是治疗 ATC 的潜在靶点。LC-MS 将 14-3-3 ε/γ 蛋白鉴定为 LNK 结合伙伴。最后，结果表明，LNK 过表达通过 Akt-NFκB-Bcl-2/Bcl-xL 途径显着增强 ATC 细胞的抗凋亡能力，并且 LNK 的致癌作用很大程度上取决于 14-3-3 ε/γ捆绑。结论 本研究阐明了 LNK 在 ATC 生长中的重要作用与其在造血系统中的行为相反，表明 LNK 是治疗 ATC 的潜在靶点。