A major risk for the development of primary open-angle glaucoma (POAG) is elevated intraocular pressure (IOP). Elevated IOP is caused by increased outflow resistance due in part to excessive extracellular matrix (ECM) deposition in the trabecular meshwork (TM). The role of transforming growth factor beta 2 (TGFβ2) in inducing ECM production is well understood. Recent studies suggest that toll-like receptor 4 (TLR4) plays an important role in fibrogenesis. We have previously described a crosstalk between TGFβ2 and TLR4 in the development of ocular hypertension and glaucomatous TM damage. Nuclear factor-kappa beta (NF-κB) is critical for TLR4 signaling. To determine the transactivation of NF-κB, TM cells were stimulated with cellular fibronectin containing the EDA isoform (cFN-EDA), TGFβ2, or lipopolysaccharide (LPS) in combination with a selective TLR4 inhibitor. cFN-EDA, TGFβ2, and LPS all induced transactivation of NF-κB and inhibition of TLR4 blocked the effect of each treatment paradigm. To evaluate the role of NF-κB in IOP regulation, we utilized our inducible mouse model of ocular hypertension by injection of Ad5.TGFβ2 in mice harboring a mutation in NF-κB and wild-type controls. IOP was measured over time and eyes accessed by immunohistochemistry for the ECM protein FN and the specific FN-EDA isoform. Ad5.TGFβ2 induced ocular hypertension and expression of FN and FN-EDA in wild-type mice, but mutation in NF-κB blocked the effect. These data suggest that NF-κB is necessary for TGFβ2-induced ECM production and ocular hypertension and the transactivation of NF-κB is dependent on both TGFβ2 and TLR4.

中文翻译：

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转化生长因子Beta-2引起的高眼压症需要核因子-κβ信号转导。

原发性开角型青光眼（POAG）发生的主要风险是眼内压（IOP）升高。IOP升高是由于部分小梁网（TM）中过多的细胞外基质（ECM）沉积导致流出阻力增加所致。众所周知，转化生长因子β2（TGFβ2）在诱导ECM产生中的作用。最近的研究表明，toll​​样受体4（TLR4）在纤维发生中起重要作用。先前我们已经描述了TGFβ2和TLR4在高眼压和青光眼TM损伤发展中的串扰。核因子κB（NF-κB）对于TLR4信号传导至关重要。为了确定NF-κB的反式激活作用，用含有EDA亚型（cFN-EDA），TGFβ2，或脂多糖（LPS）与选择性TLR4抑制剂联用。cFN-EDA，TGFβ2和LPS均可诱导NF-κB的反式激活，而对TLR4的抑制则阻断了每种治疗模式的作用。为了评估NF-κB在IOP调节中的作用，我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2，利用了我们的诱导型高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。TGFβ2和LPS均可诱导NF-κB的反式激活，而对TLR4的抑制则阻断了每种治疗模式的作用。为了评估NF-κB在IOP调节中的作用，我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用我们的诱导型高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。TGFβ2和LPS均可诱导NF-κB的反式激活，而对TLR4的抑制则阻断了每种治疗模式的作用。为了评估NF-κB在IOP调节中的作用，我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用我们的诱导型高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。LPS和LPS均可诱导NF-κB的反式激活，而TLR4的抑制则阻断了每种治疗模式的作用。为了评估NF-κB在IOP调节中的作用，我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用我们的诱导型高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。LPS和LPS均可诱导NF-κB的反式激活，而TLR4的抑制则阻断了每种治疗模式的作用。为了评估NF-κB在IOP调节中的作用，我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用我们的诱导型高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用可诱导的高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。我们通过在患有NF-κB突变和野生型对照的小鼠中注射Ad5.TGFβ2来利用可诱导的高眼压小鼠模型。随时间测量IOP，并通过免疫组化检查ECM蛋白FN和特定FN-EDA同工型的眼睛。Ad5.TGFβ2诱导高眼压和野生型小鼠FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。TGFβ2诱导了高眼压和野生型小鼠的FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。TGFβ2诱导了高眼压和野生型小鼠的FN和FN-EDA的表达，但NF-κB的突变阻止了该作用。这些数据表明，NF-κB对于TGFβ2诱导的ECM产生和高眼压是必需的，并且NF-κB的反式激活依赖于TGFβ2和TLR4。