The v-raf murine sarcoma viral homolog B1 (BRAF) gene, one of the human isoforms of RAF, is activated by Ras, leading to cooperative effects in cells responsive to growth factor signals. Recently, somatic missense mutations of the BRAF gene have been detected in more than 66% of malignant melanomas of the skin. We analyzed 42 malignant melanomas of the uvea, 3 corresponding liver metastases, and 10 cutaneous melanomas for possible BRAF mutations: after microdissection, mutation analysis of BRAF and KRAS was performed. The expression of extracellular-regulated kinase 1 and 2 (ERK1/2), an important downstream point of convergence in the Ras-RAF-MEK-Erk pathway, was analyzed immunohistochemically. Interestingly, we failed to detect activating BRAF mutations in uvea melanomas and their corresponding liver metastases. There were no mutations of BRAF in corresponding non-neoplastic uvea specimens, although we detected three BRAF mutations in sporadic cutaneous melanoma that led to a substitution of valine by glutamic acid at position 599 (V599E). KRAS mutations were detected in 1 of 10 cutaneous melanoma but not in uveal or metastatic melanoma. Despite the lack of activating mutations in the BRAF gene, we identified constitutively activated ERK in almost all (86%) uveal melanoma tissues tested but not in corresponding normal retina or uveal cells. Our data indicate that BRAF gene mutations are rare to absent events in uveal melanoma. The finding of activated Erk suggests a causative role for MAPK activation in uveal melanoma independent of activating BRAF or RAS mutations.

中文翻译：

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葡萄膜恶性黑色素瘤中 BRAF 基因突变的缺失和细胞外调节激酶的组成性激活。

v-raf 鼠肉瘤病毒同系物 B1 (BRAF) 基因是 RAF 的人类同种型之一，被 Ras 激活，导致对生长因子信号有反应的细胞产生协同效应。最近，已在超过 66% 的皮肤恶性黑色素瘤中检测到 BRAF 基因的体细胞错义突变。我们分析了 42 例葡萄膜恶性黑色素瘤、3 例相应的肝转移瘤和 10 例皮肤黑色素瘤的可能 BRAF 突变：显微解剖后，对 BRAF 和 KRAS 进行了突变分析。免疫组织化学分析了细胞外调节激酶 1 和 2 (ERK1/2) 的表达，这是 Ras-RAF-MEK-Erk 通路中重要的下游汇聚点。有趣的是，我们未能在葡萄膜黑色素瘤及其相应的肝转移中检测到激活的 BRAF 突变。在相应的非肿瘤性葡萄膜标本中没有 BRAF 突变，尽管我们在散发性皮肤黑色素瘤中检测到三个 BRAF 突变，导致第 599 位谷氨酸取代缬氨酸 (V599E)。在 10 个皮肤黑色素瘤中有 1 个检测到 KRAS 突变，但在葡萄膜或转移性黑色素瘤中未检测到。尽管 BRAF 基因缺乏激活突变，我们在几乎所有（86%）测试的葡萄膜黑色素瘤组织中发现了组成型激活的 ERK，但在相应的正常视网膜或葡萄膜细胞中没有发现。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。尽管我们在散发性皮肤黑色素瘤中检测到三个 BRAF 突变，导致第 599 位谷氨酸取代缬氨酸 (V599E)。在 10 个皮肤黑色素瘤中有 1 个检测到 KRAS 突变，但在葡萄膜或转移性黑色素瘤中未检测到。尽管 BRAF 基因缺乏激活突变，我们在几乎所有（86%）测试的葡萄膜黑色素瘤组织中发现了组成型激活的 ERK，但在相应的正常视网膜或葡萄膜细胞中没有发现。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。尽管我们在散发性皮肤黑色素瘤中检测到三个 BRAF 突变，导致第 599 位谷氨酸取代缬氨酸 (V599E)。在 10 个皮肤黑色素瘤中有 1 个检测到 KRAS 突变，但在葡萄膜或转移性黑色素瘤中未检测到。尽管 BRAF 基因缺乏激活突变，我们在几乎所有（86%）测试的葡萄膜黑色素瘤组织中发现了组成型激活的 ERK，但在相应的正常视网膜或葡萄膜细胞中没有发现。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。在 10 个皮肤黑色素瘤中有 1 个检测到 KRAS 突变，但在葡萄膜或转移性黑色素瘤中未检测到。尽管 BRAF 基因缺乏激活突变，我们在几乎所有（86%）测试的葡萄膜黑色素瘤组织中发现了组成型激活的 ERK，但在相应的正常视网膜或葡萄膜细胞中没有发现。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。在 10 个皮肤黑色素瘤中有 1 个检测到 KRAS 突变，但在葡萄膜或转移性黑色素瘤中未检测到。尽管 BRAF 基因缺乏激活突变，我们在几乎所有（86%）测试的葡萄膜黑色素瘤组织中发现了组成型激活的 ERK，但在相应的正常视网膜或葡萄膜细胞中没有发现。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。我们的数据表明 BRAF 基因突变在葡萄膜黑色素瘤中很少见或不存在。激活的 Erk 的发现表明 MAPK 激活在葡萄膜黑色素瘤中的致病作用独立于激活 BRAF 或 RAS 突变。