In the past years, the potential of electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) for the observation of intact weak interactions, such as non-covalent protein-ligand, protein-protein, protein-DNA complexes, has spread out. The coupling of ESI with time-of-flight (TOF) and quadrupole-time-of-flight (Q-TOF) analyzers has even enabled the detection of larger complexes with molecular weights greatly higher than 200 kDa. In this paper, we report a comparative ESI-MS study on the protein quaternary structure of native hemocyanins (Hc) from crabs living in different biotopes: a shore crab (Carcinus maenas) and two deep-sea crabs (Segonzacia mesatlantica and Bythograea thermydron). Hc is an extracellular blood protein, composed of several protein chains which can associate in large multimers. The goal of this study is to point out that the oligomerization state of native Hcs is biotope-dependent. Depending on the crab, ESI-MS analyses under non-denaturing conditions reveal different oligomeric forms present in equilibrium in solution. Molecular weights up to 2,235 kDa were measured for the associations of 30 subunits of the Bythograea thermydron Hc. Thanks to ESI-MS analyses, it could be concluded for the first time that the oligomerization state of native Hcs is dependent on the crab environment. The investigation of these different non-covalent self-assemblies is very important for the life history of crabs, since they are directly related with different oxygen binding abilities and thus, with their ability to colonize habitats with different oxygen contents.

中文翻译：

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通过ESI-MS对来自深海和沿海螃蟹的约2.2 MDa天然血蓝蛋白进行的比较研究：从蛋白质低聚状态到生物群落。

在过去的几年中，电喷雾电离质谱（ESI-MS）用于观察完整的弱相互作用（例如非共价蛋白-配体，蛋白-蛋白，蛋白-DNA络合物）的潜力已经散布开来。ESI与飞行时间（TOF）和四极飞行时间（Q-TOF）分析仪结合使用，甚至可以检测分子量大大高于200 kDa的较大的配合物。在本文中，我们报告了一个比较ESI-MS研究，研究了生活在不同生物群落螃蟹中的天然血蓝蛋白（Hc）的蛋白质四级结构：岸蟹（Carcinus maenas）和两只深海蟹（Segonzacia mesatlantica和Bythograea thermydron） 。Hc是一种细胞外血液蛋白，由几条可以与大型多聚体缔合的蛋白链组成。这项研究的目的是指出天然Hcs的低聚状态是生物位点依赖性的。根据蟹的不同，在非变性条件下的ESI-MS分析显示溶液中存在平衡时存在的不同寡聚形式。对于Bythograea thermydron Hc的30个亚基的缔合，测量了分子量高达2,235 kDa的分子。通过ESI-MS分析，可以首次得出结论，天然Hcs的低聚状态取决于螃蟹的环境。这些不同的非共价自组装的研究对于螃蟹的生活史非常重要，因为它们与不同的氧结合能力直接相关，因此与它们在具有不同氧含量的生境中的定殖能力有关。在非变性条件下的ESI-MS分析表明，溶液中的平衡态存在不同的低聚形式。对于Bythograea thermydron Hc的30个亚基的缔合，测量了分子量高达2,235 kDa的分子。通过ESI-MS分析，可以首次得出结论，天然Hcs的低聚状态取决于螃蟹的环境。这些不同的非共价自组装的研究对于螃蟹的生活史非常重要，因为它们与不同的氧结合能力直接相关，因此与它们在具有不同氧含量的生境中的定殖能力有关。在非变性条件下的ESI-MS分析表明，溶液中的平衡态存在不同的低聚形式。对于Bythograea thermydron Hc的30个亚基的缔合，测量了分子量高达2,235 kDa的分子。通过ESI-MS分析，可以首次得出结论，天然Hcs的低聚状态取决于螃蟹的环境。这些不同的非共价自组装的研究对于螃蟹的生活史非常重要，因为它们与不同的氧结合能力直接相关，因此与它们在具有不同氧含量的生境中的定殖能力有关。对于Bythograea thermydron Hc的30个亚基的缔合，测量了235 kDa。通过ESI-MS分析，可以首次得出结论，天然Hcs的低聚状态取决于螃蟹的环境。这些不同的非共价自组装的研究对于螃蟹的生活史非常重要，因为它们与不同的氧结合能力直接相关，因此与它们在具有不同氧含量的生境中的定殖能力有关。对于Bythograea thermydron Hc的30个亚基的缔合，测量了235 kDa。通过ESI-MS分析，可以首次得出结论，天然Hcs的低聚状态取决于螃蟹的环境。这些不同的非共价自组装的研究对于螃蟹的生活史非常重要，因为它们与不同的氧结合能力直接相关，因此与它们在具有不同氧含量的生境中的定殖能力有关。