Hepatic stellate cells (HSCs), as the most important stromal cells in the liver microenvironment, play crucial roles in hepatic fibrosis, hepatocellular carcinoma, liver regeneration and fetal liver development after transdifferentiating into myofibroblasts (MFs). Transforming growth factor β1 (TGF-β1), as an important polyergic cytokine, is involved in HSCs activation process. However, the specific mechanisms of HSCs transdifferentiation process are not clearly demonstrated. Here we added exogenous recombinant TGF-β1 protein and transforming growth factor β receptor 1 (TGF-βR1) inhibitor SB431542 into mouse HSCs to detect the detailed impact of TGF-β1 signaling on HSCs activation. TGF-β1 signaling significantly increased phosphorylated (P)-Smad2/3 level and promoted Smad2/3 translocation from the cytoplasm to the nucleus, which also caused transdifferentiation of HSCs into MFs. Importantly, TGF-β1 signaling also resulted in high expression of Notch pathway markers Notch1, Jagged1, Hes1 in HSCs. In contrast, expression of those above markers in mouse HSCs were obviously decreased after hampering TGF-β1 signaling via TGF-βR1 inhibitor SB431542. To further examine the effect of Notch pathway on HSCs activation process, TGF-β1-stimulated HSCs and control HSCs were treated with or without LY450139, a specific inhibitor of Notch pathway. LY450139 evidently decreased the expression of Notch1 and MFs marker α-smooth muscle actin (α-SMA) expression in HSCs. These above results may provide a novel insight that TGF-β1 signaling controls HSCs activation process through regulating the expression of Notch pathway markers.

中文翻译：

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TGF-β1信号通过Notch途径激活肝星状细胞。

肝星状细胞（HSC）是肝脏微环境中最重要的基质细胞，在转分化为成肌纤维细胞（MF）后，在肝纤维化，肝细胞癌，肝脏再生和胎儿肝脏发育中起着至关重要的作用。转化生长因子β1（TGF-β1）作为一种重要的多能细胞因子，参与了HSC的激活过程。然而，尚不清楚HSCs转分化过程的具体机制。在这里，我们添加了外源重组TGF-β1蛋白和转化生长因子β受体1（TGF-βR1）抑制剂SB431542到小鼠HSC中，以检测TGF-β1信号转导对HSC活化的详细影响。TGF-β1信号显着增加了磷酸化（P）-Smad2 / 3的水平，并促进了Smad2 / 3从细胞质到细胞核的转运，这也导致了HSC向MF的转分化。重要的是，TGF-β1信号转导也导致了HSC中Notch途径标记Notch1，Jagged1，Hes1的高表达。相比之下，通过TGF-βR1抑制剂SB431542抑制TGF-β1信号转导后，小鼠HSCs中上述标志物的表达明显降低。为了进一步检查Notch途径对HSC激活过程的影响，对TGF-β1刺激的HSC和对照HSC进行了有无Notch途径特异性抑制剂LY450139的治疗。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上结果可为TGF-β1信号通路通过调节Notch途径标志物的表达控制HSCs活化过程提供新的见解。TGF-β1信号传导还导致Notch通路标记Notch1，Jagged1，Hes1在HSC中高表达。相比之下，在通过TGF-βR1抑制剂SB431542抑制TGF-β1信号传导后，小鼠HSC中上述标志物的表达明显降低。为了进一步检查Notch途径对HSC激活过程的影响，对TGF-β1刺激的HSC和对照HSC进行了有无Notch途径特异性抑制剂LY450139的治疗。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSC激活过程提供了新的见解。TGF-β1信号传导还导致Notch通路标记Notch1，Jagged1，Hes1在HSC中高表达。相比之下，通过TGF-βR1抑制剂SB431542抑制TGF-β1信号转导后，小鼠HSC中上述标志物的表达明显降低。为了进一步检查Notch途径对HSC激活过程的影响，对TGF-β1刺激的HSC和对照HSC进行了有无Notch途径特异性抑制剂LY450139的治疗。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSC激活过程提供了新的见解。在通过TGF-βR1抑制剂SB431542抑制TGF-β1信号转导后，小鼠HSC中上述标志物的表达明显降低。为了进一步检查Notch途径对HSC激活过程的影响，对TGF-β1刺激的HSC和对照HSC进行了或未使用LY450139（Notch途径的特异性抑制剂）的处理。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSCs活化过程提供新的见解。在通过TGF-βR1抑制剂SB431542抑制TGF-β1信号转导后，小鼠HSC中上述标志物的表达明显降低。为了进一步检查Notch途径对HSC激活过程的影响，对TGF-β1刺激的HSC和对照HSC进行了有无Notch途径特异性抑制剂LY450139的治疗。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSCs活化过程提供新的见解。用或不使用LY450139（Notch途径的特异性抑制剂）治疗TGF-β1刺激的HSC和对照HSC。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSCs活化过程提供新的见解。用或不使用LY450139（Notch途径的特异性抑制剂）治疗TGF-β1刺激的HSC和对照HSC。LY450139明显降低了HSC中Notch1和MFs标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。以上这些结果可能为TGF-β1信号传导通过调节Notch通路标志物的表达控制HSCs活化过程提供新的见解。