Cathepsins are key mammalian proteases that play an important role in the immune response. Several studies have revealed the versatile and critical functions of cathepsins. Here, we obtained ten kinds of cathepsin homologs and identified seven homologs with complete coding sequences. Phylogenetic analysis verified their identities and supported the classification of cathepsins into seven families, which is similar to other vertebrates. Tissue-specific expression analysis showed that all lamprey cathepsins (L-cathepsins) are present in the supraneural body (SB), kidney, gill, intestine, brain, heart, and liver, but their relative abundance varied among tissues. Additionally, we focused on the lamprey cathepsin L (L-cathepsin L) and used recombinant L-cathepsin L protein (rL-cathepsin L) to prepare anti rL-cathepsin L polyclonal antibodies, which were used to detect its distribution in lamprey tissues. The L-cathepsin L protein was primarily detected in the SB, kidney, gill, intestine, brain, and liver via western blot and immunohistochemistry assays. Importantly, quantitative real-time PCR (RT-PCR) revealed that the expression level of L-cathepsins mRNA significantly increased after exposure to three different stimuli (poly I:C, Staphylococcus aureus (S.a) and Vibro anguilarum (V.an)). This suggested that L-cathepsins may participate in defense processes. These results revealed that L-cathepsins may play key roles in the immune response to exogenous stimuli. The findings provide important information for future studies aiming to understand the molecular mechanisms underlying the immune response to pathogen invasion in lamprey.

中文翻译：

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七the鳗组织蛋白酶基因的鉴定和表征。

组织蛋白酶是关键的哺乳动物蛋白酶，在免疫反应中起重要作用。多项研究揭示了组织蛋白酶的多功能和关键功能。在这里，我们获得了十种组织蛋白酶同源物，并鉴定了七个具有完整编码序列的同源物。系统发育分析证实了它们的身份，并支持组织蛋白酶分为七个家族，与其他脊椎动物相似。组织特异性表达分析表明，所有七lamp鳗组织蛋白酶（L-组织蛋白酶）都存在于上膜体（SB），肾脏，腮，肠，脑，心脏和肝脏中，但它们的相对丰度在组织中有所不同。此外，我们专注于七the鳗组织蛋白酶L（L-cathepsin L），并使用重组L-cathepsin L蛋白（rL-cathepsin L）制备抗rL-cathepsin L多克隆抗体，用于检测其在七lamp鳗组织中的分布。L-组织蛋白酶L蛋白主要通过Western印迹和免疫组化分析在SB，肾脏，腮，肠，脑和肝脏中检测到。重要的是，定量实时PCR（RT-PCR）显示，暴露于三种不同的刺激物（poly I：C，金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））后，L-蛋白酶的mRNA表达水平显着增加。 。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。L-组织蛋白酶L蛋白主要通过Western印迹和免疫组化分析在SB，肾脏，腮，肠，脑和肝脏中检测到。重要的是，定量实时PCR（RT-PCR）显示，暴露于三种不同的刺激物（poly I：C，金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））后，L-蛋白酶的mRNA表达水平显着增加。 。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。L-组织蛋白酶L蛋白主要通过Western印迹和免疫组化分析在SB，肾脏，腮，肠，脑和肝脏中检测到。重要的是，定量实时PCR（RT-PCR）显示，暴露于三种不同的刺激物（poly I：C，金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））后，L-蛋白酶的mRNA表达水平显着增加。 。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。免疫印迹和免疫组化分析检测肝脏和肝脏。重要的是，定量实时PCR（RT-PCR）显示，暴露于三种不同的刺激物（poly I：C，金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））后，L-蛋白酶的mRNA表达水平显着增加。 。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。免疫印迹和免疫组化分析检测肝脏和肝脏。重要的是，定量实时PCR（RT-PCR）显示，暴露于三种不同的刺激物（poly I：C，金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））后，L-蛋白酶的mRNA表达水平显着增加。 。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。金黄色葡萄球菌（Sa）和Vibro anguilarum（V.an））。这表明L-蛋白酶可以参与防御过程。这些结果表明，L-蛋白酶可以在对外源性刺激的免疫反应中发挥关键作用。这些发现为将来的研究提供了重要信息，这些研究旨在了解针对七lamp鳗的病原体入侵的免疫反应的分子机制。