BACKGROUND To establish a fast and simple quantitative method for detection of heart-type fatty acid-binding protein (H-FABP) in serum based on a background fluorescence quenching immunochromatographic assay. METHODS A detection card based on the double-antibody sandwich double-antibody method with background fluorescence quenching was developed for quantitative measurement of H-FABP in serum. The optimal concentrations of control for coating the test and control lines were determined as well as the concentrations of gold-labeled antibodies used in preparing the detection system. The detection method for H-FABP in serum was established and validated using real-world clinical samples. RESULTS The optimal concentrations of labeling antibody and coating antibody were 5.0 μg/mL and 1.0 mg/mL, respectively. The test card had a sensitivity of 1.15 ng/mL over a linear concentration range of 0-100 ng/mL. Based on three batches prepared for testing the card, the relative standard deviation (RSD) within batches was less than 15% without a significant difference (P=0.942). The detection method was tested against common interfering substances in serum, such as bilirubin, triglyceride and serum anticoagulants ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA), heparin, and sodium citrate, and no significant cross-reaction was detected. The test method was further validated with 50 clinical serum samples, and the test results were comparable with standard reference detection methods with good correlation (R=0.95). CONCLUSION Our study presents a new method with strong specificity and sensitivity for the detection of H-FABP in serum, which could promote H-FABP detection in a broad range of applications. UVOD Cilj ovog rada je bio da se izradi brz i jednostavan kvantitativni metod za detekciju srčanog vezujućeg proteina za masne kiseline (H-FABP) u serumu na osnovu fluores-centnog imunohromatografskog određivanja. METODE Detekciona karta se zasniva na duploj antibodi sendvič duploj-antibodi metodi zasnovanoj na fluorescenciji i razvijenoj za kvantitativno merenje H-FABP u serumu. Određene su optimalne koncentracije za presvlačenje linija testa i kontrola kao i koncentracije antitela označenih zlatom pri pripremi samog sistema. Uspostavljen je detekcioni metod za H-FABP u serumu i validiran primenom priznatih svetskih kliničkih metoda. REZULTATI Optimalne koncentracije označenih anititela i pre-svučenih antitela bile su 5,0 μg/mL odnosno 1,0 mg/mL. Test karta imala je osetljivost 1,15 ng/mL u opsegu linearne koncentracije od 0–100 ng/mL. Na osnovu pripremljene tri grupe uzoraka za ispitivanje karte dobijena je relativna standardna devijacija (SD) između grupa manja od 15% bez značajnih razlika (P = 0,942). Metod detekcije ispitivan je naspram uobičajenih interferujućih supstanci u serumu, kao što su bilirubin, trigliceridi i serumski antikoagulansi etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), heparin i natrijum citrat i pri tom nije nađena bilo kakva interferencija. Metoda je zatim validovana na 50 kliničkih serumskih uzoraka, pri čemu su rezultati bili uporedivi sa standardnim detekcionim metodama i dobrom korelacijom (R = 0,95). ZAKLJUČAK Naša izučavanja predstavljaju novu metodu sa snažnom specifičnošću i osetljivosti za detekciju H-FABP u serumu, pa se može preporučiti za širu upotrebu.

中文翻译：

---

基于背景荧光猝灭免疫色谱的心型脂肪酸结合蛋白定量检测卡的研制。

背景技术基于背景荧光猝灭免疫层析法建立一种快速简便的血清中心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的定量检测方法。方法开发了一种基于双抗体夹心双抗体法背景荧光猝灭的检测卡，用于血清中H-FABP的定量检测。确定了用于涂覆测试和对照线的最佳对照浓度以及用于制备检测系统的金标记抗体的浓度。使用真实世界的临床样本建立并验证了血清中 H-FABP 的检测方法。结果标记抗体和包被抗体的最佳浓度分别为5.0 μg/mL和1.0 mg/mL。测试卡的灵敏度为 1。在 0-100 ng/mL 的线性浓度范围内为 15 ng/mL。基于为测试卡片准备的三个批次，批次内的相对标准偏差（RSD）小于15％，无显着差异（P = 0.942）。该检测方法针对血清中常见的干扰物质，如胆红素、甘油三酯和血清抗凝剂乙二胺四乙酸（EDTA）、肝素、柠檬酸钠进行了检测，未检测到明显的交叉反应。该检测方法经50份临床血清样本进一步验证，检测结果与标准参考检测方法具有可比性，相关性良好（R=0.95）。结论我们的研究提出了一种特异性和敏感性强的血清H-FABP检测新方法，可促进H-FABP检测的广泛应用。UVOD Cilj ovog rada je bio da se izradi brz i jednostavan kvantitativni metod za detekciju srčanog vezujućeg proteina za masne kiseline (H-FABP) u serialu na osnovu fluores-centnog imunohromatografskog određivanja。METODE Detekciona karta se zasniva na duploj antibodi sendvič duploj-antibodi metodi zasnovanoj na fluorescenciji i razvijenoj za kvantitativno merenje H-FABP u 血清。Određene su optimizene koncentracije za presvlačenje linija testa i kontrola kao i koncentracije antitela označenih zlatom pri pripremi samog sistema。Uspostavljen je detekcioni 方法 za H-FABP u 血清 i validiran primenom priznatih svetskih kliničkih 方法。REZULTATI Optimalne koncentracije označenih anititela i pre-svučenih antitela 胆汁 su 5,0 μg/mL odnosno 1,0 mg/mL。测试 karta imala je osetljivost 1,15 ng/mL u opsegu linearne koncentracije od 0–100 ng/mL。Na osnovu pripremljene tri grupe uzoraka za ispitivanje karte dobijena je relativna standardna devijacija (SD) između grupa manja od 15% bez značajnih razlika (P = 0,942)。Metod detekcije ispitivan je naspram uobičajenih interferujućih supstanci u serialu, kao što su bilirubin, trigliceridi i serialski antikoagulansi etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), heparin i natrijum citrat i pri tom nije nađena bilo kakva internerncija。Metoda je zatim validovana na 50 kliničkih serialskih uzoraka, pri čemu su rezultati bili uporedivi sa standardnim detekcionim metodama i dobrom korelacijom (R = 0,95)。ZAKLJUČAK Naša izučavanja predstavljaju novu metodu sa snažnom specifičnošću i osetljivosti za detekciju H-FABP u serialu, pa se može preporučiti za širu upotrebu。