In this study, 63 compounds measured as 10 individual mixtures containing in each case an active pharmaceutical ingredient and its relevant impurities, and additional set of 7 basic beta blockers were analyzed using ultra-high performance supercritical fluid chromatography with UV and mass spectrometry detection. The separations were accomplished using 8 different stationary phases (diol, diethylamine, 2-picolylamine, 1-aminoanthracene, BEH 2-ethylpyridine, BEH, CSH pentafluorophenyl, and HSS C18 SB), 6 modifiers (methanol, ethanol, isopropanol, methanol/acetonitrile, methanol/ethanol, ethanol/acetonitrile) and 5 additives in methanol (0.1% formic acid, 10 mmol/L ammonium formate, 10 mmol/L ammonium acetate, 0.4% ammonium hydroxide, and 2% water). The resulting chromatograms were evaluated using 6 selected parameters: number of eluted peaks, number of separated peaks, resolution between active pharmaceutical ingredient and following impurity, peak symmetry, peak width at 50% of the peak height, and selectivity. Volatile additives such as ammonium formate, ammonium acetate, and especially ammonium hydroxide provided overall generic approach with very good chromatographic performance. Combined modifier methanol/acetonitrile (1:1) was important for separations of some critical pairs in case of neutral compounds. Diol stationary phase proved its suitability for wide range of applications when the separations of all mixtures were satisfactory on this column, except for vardenafil and beta blockers mixture. HSS C18 SB stationary phase offered unique complementary selectivity especially for analysis of structurally close compounds and/or isomers.

中文翻译：

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杂质控制中的超高效超临界流体色谱：寻找通用筛选方法

在这项研究中，63 种化合物作为 10 种单独的混合物进行了测量，每种混合物都含有一种活性药物成分及其相关杂质，以及另外一组 7 种碱性 β 受体阻滞剂，使用具有紫外和质谱检测的超高效超临界流体色谱法进行了分析。使用 8 种不同的固定相（二醇、二乙胺、2-吡啶甲胺、1-氨基蒽、BEH 2-乙基吡啶、BEH、CSH 五氟苯基和 HSS C18 SB）和 6 种改性剂（甲醇、乙醇、异丙醇、甲醇/乙腈）完成分离、甲醇/乙醇、乙醇/乙腈）和 5 种添加剂的甲醇溶液（0.1% 甲酸、10 mmol/L 甲酸铵、10 mmol/L 乙酸铵、0.4% 氢氧化铵和 2% 水）。使用 6 个选定的参数评估所得色谱图：洗脱峰的数量、分离峰的数量、活性药物成分与后续杂质之间的分离度、峰对称性、峰高 50% 处的峰宽和选择性。挥发性添加剂，如甲酸铵、乙酸铵，尤其是氢氧化铵，提供了具有非常好的色谱性能的整体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。活性药物成分与后续杂质之间的分离度、峰对称性、峰高 50% 处的峰宽和选择性。挥发性添加剂，如甲酸铵、乙酸铵，尤其是氢氧化铵，提供了具有非常好的色谱性能的整体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。活性药物成分与后续杂质之间的分离度、峰对称性、峰高 50% 处的峰宽和选择性。挥发性添加剂，如甲酸铵、乙酸铵，尤其是氢氧化铵，提供了具有非常好的色谱性能的整体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。峰高的 50% 处的峰宽和选择性。挥发性添加剂，如甲酸铵、乙酸铵，尤其是氢氧化铵，提供了具有非常好的色谱性能的整体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。峰高的 50% 处的峰宽和选择性。挥发性添加剂，如甲酸铵、乙酸铵，尤其是氢氧化铵，提供了具有非常好的色谱性能的整体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。尤其是氢氧化铵提供了具有非常好的色谱性能的总体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。尤其是氢氧化铵提供了具有非常好的色谱性能的总体通用方法。在中性化合物的情况下，混合改性剂甲醇/乙腈 (1:1) 对于分离一些关键对很重要。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。当除伐地那非和 β 受体阻滞剂混合物外的所有混合物在该色谱柱上的分离均令人满意时，二醇固定相证明其适用于广泛的应用。HSS C18 SB 固定相提供了独特的互补选择性，尤其适用于结构接近的化合物和/或异构体的分析。