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Flow variation as a factor determining repeatability of the internal standard-based qualitative and quantitative analyses by capillary electrophoresis
Journal of Chromatography A ( IF 3.8 ) Pub Date : 2018-03-14 , DOI: 10.1016/j.chroma.2018.03.026
Paweł Mateusz Nowak , Michał Woźniakiewicz , Paweł Kościelniak

The use of migration times and peak areas referred to another sample component − internal standard, brings many benefits in improving reliability of capillary electrophoresis. However, it is quite commonly overlooked that despite relative migration time and peak area ratio are more stable than the absolute values upon alteration in the flow rate, some shift should always be expected. The present work offers a new look at this analytically-important issue. We have derived a simple model allowing to estimate the magnitude of error for the selected pair of molecules of known mobilities upon the given flow alteration. Then, we have confronted the theoretical predictions with the experimental results obtained for the model sample separated in various flow conditions reached by the external pressure manipulation, including several internal standards of different mobilities. A good agreement has been obtained, pointing out that the magnitude of error may be large even for the seemingly “good” internal standards. Several potentially useful means have been tested to address this issue: the use of electrophoretic mobilities and electrophoretic mobility ratios instead migration times in the qualitative analysis, and performing time-correction of peak area ratios, or alternatively, transformation of electropherograms from the time-related scale into the electrophoretic mobility-related scale in the quantitative analysis. We have also considered some additional factors. The results may be of interest for all users dealing with the development and optimization of analytical methods using capillary electrophoresis.



中文翻译:

流量变化是决定基于毛细管电泳的内标定性和定量分析可重复性的因素

使用迁移时间和峰面积作为另一种样品组分(内标)的参考,在改善毛细管电泳的可靠性方面带来了很多好处。然而,尽管相对迁移时间和峰面积比在流速改变时比绝对值更稳定,但通常还是被忽略了,但总应该预期会有一些偏移。当前的工作为这个分析上重要的问题提供了新的视角。我们已经推导出了一个简单的模型,该模型可以根据给定的流量变化估算出已知迁移率的选定分子对的误差幅度。然后,我们通过在通过外部压力操作达到的各种流动条件下分离出的模型样品所获得的实验结果来面对理论预测。包括几种不同机动性的内部标准。已经获得了良好的共识,指出即使对于看似“良好”的内部标准,误差的幅度也可能很大。已经测试了几种潜在有用的方法来解决此问题:在定性分析中使用电泳迁移率和电泳迁移率代替迁移时间,对峰面积比进行时间校正,或者从与时间相关的电泳图转换在定量分析中,将氧化皮的比例转换为与电泳迁移率相关的比例。我们还考虑了其​​他一些因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。已经获得了良好的共识,指出即使对于看似“良好”的内部标准,误差的幅度也可能很大。已经测试了几种潜在有用的方法来解决此问题:在定性分析中使用电泳迁移率和电泳迁移率代替迁移时间,对峰面积比进行时间校正,或者从与时间相关的电泳图转换在定量分析中,将氧化皮的比例转换为与电泳迁移率相关的比例。我们还考虑了其​​他一些因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。已经获得了良好的共识,指出即使对于看似“良好”的内部标准,误差的幅度也可能很大。已经测试了几种潜在有用的方法来解决此问题:在定性分析中使用电泳迁移率和电泳迁移率代替迁移时间,对峰面积比进行时间校正,或者从与时间相关的电泳图转换在定量分析中,将氧化皮的比例转换为与电泳迁移率相关的比例。我们还考虑了其​​他一些因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。已经测试了几种潜在有用的方法来解决此问题:在定性分析中使用电泳迁移率和电泳迁移率代替迁移时间,对峰面积比进行时间校正,或者从与时间相关的电泳图转换在定量分析中,将氧化皮的比例转换为与电泳迁移率相关的比例。我们还考虑了一些其他因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。已经测试了几种潜在有用的方法来解决此问题:在定性分析中使用电泳迁移率和电泳迁移率代替迁移时间,对峰面积比进行时间校正,或者从与时间相关的电泳图转换在定量分析中,将氧化皮的比例转换为与电泳迁移率相关的比例。我们还考虑了其​​他一些因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。或者,在定量分析中,将电泳图从时间相关标度转换为电泳迁移率相关标度。我们还考虑了一些其他因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。或者,在定量分析中,将电泳图从时间相关标度转换为电泳迁移率相关标度。我们还考虑了其​​他一些因素。对于使用毛细管电泳分析方法的开发和优化的所有用户,结果可能都是感兴趣的。

更新日期:2018-03-14
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