Sorafenib remains the only approved drug for treating patients with advanced hepatocellular carcinoma (HCC). However, the therapeutic effect of sorafenib is transient, and patients invariably develop sorafenib resistance (SR). Recently, TYRO3, a member of the TYRO3‐AXL‐MER family of receptor tyrosine kinases, was identified as being aberrantly expressed in a significant proportion of HCC; however, its role in SR is unknown. In this study, we generated two functionally distinct sorafenib‐resistant human Huh‐7 HCC cell lines in order to identify new mechanisms to abrogate acquired SR as well as new potential therapeutic targets in HCC. Initially, we investigated the effects of a microRNA (miR), miR‐7‐5p (miR‐7), in both in vitro and in vivo preclinical models of human HCC and identified miR‐7 as a potent tumor suppressor of human HCC. We identified TYRO3 as a new functional target of miR‐7, which regulates proliferation, migration, and invasion of Huh‐7 cells through the phosphoinositide 3‐kinase/protein kinase B pathway and is markedly elevated with acquisition of SR. Furthermore, miR‐7 effectively silenced TYRO3 expression in both sorafenib‐sensitive and sorafenib‐resistant Huh‐7 cells, inhibiting TYRO3/growth arrest specific 6‐mediated cancer cell migration and invasion. Conclusion: We identified a mechanism for acquiring SR in HCC that is through the aberrant expression of the TYRO3/phosphoinositide 3‐kinase/protein kinase B signal transduction pathway, and that can be overcome by miR‐7 overexpression. Taken together, these data suggest a potential role for miR‐7 as an RNA‐based therapeutic to treat refractory and drug‐resistant HCC. (Hepatology 2018;67:216‐231)

中文翻译：

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miR-7/GAS6/TYRO3 轴调节索拉非尼耐药细胞在人肝细胞癌中的生长和侵袭

索拉非尼仍然是唯一获批用于治疗晚期肝细胞癌 (HCC) 患者的药物。然而，索拉非尼的治疗效果是短暂的，患者总是会出现索拉非尼耐药（SR）。最近，TYRO3 是 TYRO3-AXL-MER 受体酪氨酸激酶家族的成员，被鉴定为在很大比例的 HCC 中异常表达；然而，它在 SR 中的作用是未知的。在这项研究中，我们生成了两种功能不同的索拉非尼耐药人类 Huh-7 HCC 细胞系，以确定消除获得性 SR 的新机制以及 HCC 中新的潜在治疗靶点。最初，我们研究了 microRNA (miR) miR-7-5p (miR-7) 在人类 HCC 的体外和体内临床前模型中的作用，并确定 miR-7 是人类 HCC 的有效肿瘤抑制因子。我们将 TYRO3 鉴定为 miR-7 的新功能靶点，它通过磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 途径调节 Huh-7 细胞的增殖、迁移和侵袭，并随着 SR 的获得而显着升高。此外，miR-7 有效地沉默了索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制了 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，即通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）它通过磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 途径调节 Huh-7 细胞的增殖、迁移和侵袭，并随着 SR 的获得而显着升高。此外，miR-7 有效地沉默了索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制了 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）它通过磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 途径调节 Huh-7 细胞的增殖、迁移和侵袭，并随着 SR 的获得而显着升高。此外，miR-7 有效地沉默了索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制了 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）Huh-7 细胞通过磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 途径侵入，并且随着 SR 的获得显着升高。此外，miR-7 有效地沉默了索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制了 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）和通过磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 途径侵入 Huh-7 细胞，并且随着 SR 的获得显着升高。此外，miR-7 有效地沉默了索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制了 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）miR-7 有效沉默索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）miR-7 有效沉默索拉非尼敏感和索拉非尼耐药 Huh-7 细胞中 TYRO3 的表达，抑制 TYRO3/生长阻滞特异性 6 介导的癌细胞迁移和侵袭。结论：我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）我们确定了一种在 HCC 中获得 SR 的机制，该机制是通过 TYRO3/磷酸肌醇 3-激酶/蛋白激酶 B 信号转导途径的异常表达，并且可以通过 miR-7 过表达来克服。综上所述，这些数据表明 miR-7 作为一种基于 RNA 的疗法治疗难治性和耐药性 HCC 的潜在作用。（肝病学 2018 年；67：216-231）