Ubiquitin-specific-processing proteases 35 (USP35) is an under-characterized deubiquitinase and its role in colorectal cancer (CRC) remains unclear. Here, we focus on delineating the impact of USP35 on CRC cell proliferation and chemo-resistance, as well as the possible regulatory mechanism. By examining the genomic database and clinical samples, we found that USP35 was overexpressed in CRC. Further functional studies showed that enhanced USP35 expression promoted CRC cell proliferation and resistance to oxaliplatin (OXA) and 5-fluorouracil (5-FU), whereas USP35 depletion impeded cell proliferation and sensitized cells to OXA and 5-FU treatments. Then, to explore the possible mechanism underlying USP35-triggered cellular responses, we performed co-immunoprecipitation (co-IP) followed by mass spectrometry (MS) analysis and identified α-L-fucosidase 1 (FUCA1) as a direct deubiquitiation target of USP35. Importantly, we demonstrated that FUCA1 was an essential mediator for USP35-induced cell proliferation and chemo-resistance in vitro and in vivo. Finally, we observed that nucleotide excision repair (NER) components (e.g., XPC, XPA, ERCC1) were up-regulated by USP35-FUCA1 axis, indicating a potential mechanism for USP35-FUCA1-mediated platinum resistance in CRC. Together, our results for the first time explored the role and important mechanism of USP35 in CRC cell proliferation and chemotherapeutic response, providing a rationale for USP35-FUCA1-targeted therapy in CRC.

泛素特异性加工蛋白酶 35 (USP35) 是一种未充分表征的去泛素化酶，其在结直肠癌 (CRC) 中的作用仍不清楚。在这里，我们重点描述 USP35 对 CRC 细胞增殖和化学抗性的影响，以及可能的调节机制。通过检查基因组数据库和临床样本，我们发现 USP35 在 CRC 中过表达。进一步的功能研究表明，增强的 USP35 表达促进 CRC 细胞增殖和对奥沙利铂 (OXA) 和 5-氟尿嘧啶 (5-FU) 的耐药性，而 USP35 耗竭阻碍细胞增殖并使细胞对 OXA 和 5-FU 治疗敏感。然后，为了探索 USP35 触发细胞反应的可能机制，我们进行了免疫共沉淀 (co-IP)，然后进行质谱 (MS) 分析，并将 α-L-岩藻糖苷酶 1 (FUCA1) 鉴定为 USP35 的直接去泛素化靶标。重要的是，我们证明了 FUCA1 是 USP35 诱导的细胞增殖和体外和体内化学抗性的重要介质。最后，我们观察到核苷酸切除修复 (NER) 成分（例如，XPC、XPA、ERCC1）被 USP35-FUCA1 轴上调，表明 USP35-FUCA1 介导的 CRC 铂耐药的潜在机制。总之，我们的结果首次探讨了 USP35 在 CRC 细胞增殖和化疗反应中的作用和重要机制，为 USP35-FUCA1 靶向治疗 CRC 提供了理论基础。我们证明了 FUCA1 是 USP35 诱导的细胞增殖和体外和体内化学抗性的重要介质。最后，我们观察到核苷酸切除修复 (NER) 成分（例如，XPC、XPA、ERCC1）被 USP35-FUCA1 轴上调，表明 USP35-FUCA1 介导的 CRC 铂耐药的潜在机制。总之，我们的结果首次探讨了 USP35 在 CRC 细胞增殖和化疗反应中的作用和重要机制，为 USP35-FUCA1 靶向治疗 CRC 提供了理论基础。我们证明了 FUCA1 是 USP35 诱导的细胞增殖和体外和体内化学抗性的重要介质。最后，我们观察到核苷酸切除修复 (NER) 成分（例如，XPC、XPA、ERCC1）被 USP35-FUCA1 轴上调，表明 USP35-FUCA1 介导的 CRC 铂耐药的潜在机制。总之，我们的结果首次探讨了 USP35 在 CRC 细胞增殖和化疗反应中的作用和重要机制，为 USP35-FUCA1 靶向治疗 CRC 提供了理论基础。表明 CRC 中 USP35-FUCA1 介导的铂耐药性的潜在机制。总之，我们的结果首次探讨了 USP35 在 CRC 细胞增殖和化疗反应中的作用和重要机制，为 USP35-FUCA1 靶向治疗 CRC 提供了理论基础。表明 CRC 中 USP35-FUCA1 介导的铂耐药性的潜在机制。总之，我们的结果首次探讨了 USP35 在 CRC 细胞增殖和化疗反应中的作用和重要机制，为 USP35-FUCA1 靶向治疗 CRC 提供了理论基础。