Peanut is an important food allergen but cannot currently be reliably detected and quantified in processed foods at low levels. Three mg protein/Kg is increasingly being used as a reference dose above which precautionary allergen labeling (PAL) is applied to food products. Two exemplar matrices (chocolate dessert and chocolate bar) were prepared and incurred at 0, 3, 10 or 50 mg/Kg peanut protein using a commercially available lightly roasted peanut flour ingredient. After simple buffer extraction employing an acid labile detergent, multiple reaction monitoring (MRM) experiments were used to assess matrix effects on detection of a set of seven peptide targets derived from peanut allergens using either conventional or microfluidic chromatographic separation prior to mass spectrometry. Microfluidic separation provided greater sensitivity and increased ionisation efficiency at low levels. Individual monitored transitions were detected in consistent ratios across the dilution series performed, independent of matrix. The peanut protein content of each sample was then determined using ELISA and the optimised MRM method. Whilst other peptide targets were detected with three transitions at the 50 mg/Kg peanut protein level in both matrices, only Arah2(Q6PSU2)147-155 could quantify reliably, and only in the chocolate dessert at 10 mg/Kg peanut protein. Recoveries were consistent with ELISA analysis returning around 30-50% of the incurred dose. MS coupled with microfluidic separation shows great promise as a complementary analytical tool for allergen detection and quantification in complex foods using simple extraction methodology.

中文翻译：

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微流控分离与质谱联用定量复杂食品基质中的花生过敏原

花生是一种重要的食物过敏原，但目前尚不能在低含量的加工食品中可靠地检测和定量。越来越多地将3 mg蛋白/ Kg用作参考剂量，在此参考剂量之上，将预防性过敏原标签（PAL）应用于食品。制备了两个示例性基质（巧克力甜点和巧克力棒），并使用市售的轻度烘烤的花生粉成分以0、3、10或50 mg / Kg花生蛋白的剂量加入。在使用酸不稳定的去污剂进行简单的缓冲液萃取后，使用多重反应监测（MRM）实验来评估基质对质谱检测之前使用常规或微流体色谱分离法检测花生过敏原衍生的七个肽靶标的影响。微流体分离在低浓度下提供了更高的灵敏度和更高的电离效率。在整个稀释系列中以独立的比率检测到各个监测到的过渡，而与基质无关。然后使用ELISA和优化的MRM方法确定每个样品的花生蛋白含量。虽然在两种基质中都以50 mg / Kg花生蛋白水平检测到了其他三个肽段跃迁的样品，但只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，而在巧克力甜品中仅以10 mg / Kg花生蛋白进行了定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。在整个稀释系列中以独立的比率检测到各个监测到的过渡，而与基质无关。然后使用ELISA和优化的MRM方法确定每个样品的花生蛋白含量。虽然在两种基质中都以50 mg / Kg花生蛋白水平检测到了其他三个肽段跃迁的样品，但只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，而在巧克力甜品中仅以10 mg / Kg花生蛋白进行了定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。在整个稀释系列中以独立的比率检测到各个监测到的过渡，而与基质无关。然后使用ELISA和优化的MRM方法确定每个样品的花生蛋白含量。尽管在两种基质中都以50 mg / Kg花生蛋白水平检测到了其他三个肽段跃迁的样品，但是只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，而在巧克力甜品中只有10 mg / Kg花生蛋白可以可靠地定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。然后使用ELISA和优化的MRM方法确定每个样品的花生蛋白含量。尽管在两种基质中都以50 mg / Kg花生蛋白水平检测到了其他三个肽段跃迁的样品，但是只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，而在巧克力甜品中只有10 mg / Kg花生蛋白可以可靠地定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。然后使用ELISA和优化的MRM方法确定每个样品的花生蛋白含量。尽管在两种基质中都以50 mg / Kg花生蛋白水平检测到了其他三个肽段跃迁的样品，但是只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，而在巧克力甜品中只有10 mg / Kg花生蛋白可以可靠地定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，并且只能在巧克力甜品中以10 mg / Kg花生蛋白定量。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。只有Arah2（Q6PSU2）147-155可以可靠地定量，并且仅在巧克力甜点中的花生蛋白含量为10 mg / Kg。回收率与ELISA分析结果相符，约为所产生剂量的30-50％。MS与微流控分离结合使用简单的提取方法，可以作为复杂食品中过敏原的检测和定量分析的补充分析工具，具有广阔的前景。