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Silencing lncRNAs PVT1 Upregulates miR-145 and Confers Inhibitory Effects on Viability, Invasion, and Migration in EC.
Molecular Therapy - Nucleic Acids ( IF 8.8 ) Pub Date : 2019-12-06 , DOI: 10.1016/j.omtn.2019.11.030
Si-Ning Shen 1 , Ke Li 2 , Ying Liu 2 , Cheng-Liang Yang 3 , Chun-Yu He 3 , Hao-Rang Wang 1
Affiliation  

Long non-coding RNA (lncRNA) plasmacytoma variant translocation 1 (PVT1) is correlated to various malignant tumors. Consequently, we explored effects of lncRNA PVT1 on esophageal carcinoma (EC) targeting microRNA-145 (miR-145). EC tissues, adjacent normal tissues, and EC-related cell lines were collected and cultured. Expression of lncRNA PVT1, miR-145, fascin-1 (FSCN1), and related genes with intervening expression of PVT1 and miR-145 was determined. Bioinformatic website, dual-luciferase reporter assay, and RNA immunoprecipitation (RIP) were carried to verify target relationship among lncRNA PVT1, FSCN1, and miR-145. Scratch test, Transwell assay, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay, and flow cytometry were performed for detection of migration, invasion, viability, and apoptosis of transfected cells, respectively. Finally, tumor formation in nude mice was measured. After database analysis, lncRNA PVT1, miR-145, and FSCN1 were selected for study. lncRNA PVT1 and FSCN1 can bind to miR-145. After overexpressing miR-145 or inhibiting lncRNA PVT1, EC cell viability, migration, and invasion were inhibited, while volume and weight of tumor formation in nude mice decreased. Expression of lncRNA PVT1, FSCN1, Bcl-2, CD147, VEGFR2, and MTA1 decreased and expression of miR-145 and Bax increased. Silencing lncRNA PVT1 can upregulate miR-145, which is a tumor suppressor in EC via knockdown of FSCN1. Thus, we might provide a potential theoretical basis for EC treatment.



中文翻译:

沉默 lncRNA PVT1 上调 miR-145 并对 EC 中的活力、侵袭和迁移产生抑制作用。

长链非编码 RNA (lncRNA) 浆细胞瘤变异易位 1 (PVT1) 与多种恶性肿瘤相关。因此,我们探索了 lncRNA PVT1 对靶向 microRNA-145 (miR-145) 的食管癌 (EC) 的影响。收集并培养 EC 组织、邻近正常组织和 EC 相关细胞系。确定了 lncRNA PVT1、miR-145、fascin-1 (FSCN1) 和具有 PVT1 和 miR-145 干预表达的相关基因的表达。通过生物信息学网站、双荧光素酶报告基因检测和 RNA 免疫沉淀 (RIP) 验证 lncRNA PVT1、FSCN1 和 miR-145 之间的靶标关系。进行划痕试验、Transwell 试验、3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑 (MTT) 试验和流式细胞术检测转染细胞的迁移、侵袭、活力和凋亡, 分别。最后,测量裸鼠中的肿瘤形成。经过数据库分析,选择lncRNA PVT1、miR-145和FSCN1进行研究。lncRNA PVT1 和 FSCN1 可以与 miR-145 结合。过表达 miR-145 或抑制 lncRNA PVT1 后,EC 细胞活力、迁移和侵袭受到抑制,而裸鼠肿瘤形成的体积和重量减少。lncRNA PVT1、FSCN1、Bcl-2、CD147、VEGFR2和MTA1的表达降低,而miR-145和Bax的表达增加。沉默 lncRNA PVT1 可以通过敲低 FSCN1 上调 miR-145,这是 EC 中的肿瘤抑制因子。因此,我们可能为 EC 治疗提供潜在的理论基础。过表达 miR-145 或抑制 lncRNA PVT1 后,EC 细胞活力、迁移和侵袭受到抑制,而裸鼠肿瘤形成的体积和重量减少。lncRNA PVT1、FSCN1、Bcl-2、CD147、VEGFR2和MTA1的表达降低,而miR-145和Bax的表达增加。沉默 lncRNA PVT1 可以通过敲低 FSCN1 上调 miR-145,这是 EC 中的肿瘤抑制因子。因此,我们可能为 EC 治疗提供潜在的理论基础。过表达 miR-145 或抑制 lncRNA PVT1 后,EC 细胞活力、迁移和侵袭受到抑制,而裸鼠肿瘤形成的体积和重量减少。lncRNA PVT1、FSCN1、Bcl-2、CD147、VEGFR2和MTA1的表达降低,而miR-145和Bax的表达增加。沉默 lncRNA PVT1 可以通过敲低 FSCN1 上调 miR-145,这是 EC 中的肿瘤抑制因子。因此,我们可能为 EC 治疗提供潜在的理论基础。它是通过敲低 FSCN1 在 EC 中的肿瘤抑制因子。因此,我们可能为 EC 治疗提供潜在的理论基础。它是通过敲低 FSCN1 在 EC 中的肿瘤抑制因子。因此,我们可能为 EC 治疗提供潜在的理论基础。

更新日期:2019-12-06
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