The risks of chronic immunosuppression limit the utility of vascularized composite allotransplantation (VCA) as a reconstructive option in complex tissue defects. We evaluated a novel, clinically translatable, radiation-free conditioning protocol that combines anti-lymphocyte serum (ALS), tacrolimus, and cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4 immunoglobulin (CTLA4-Ig) with adipose-derived stromal cells (ASCs) to allow VCA survival without long-term systemic immunosuppression. Full-mismatched rat hind-limb-transplant recipients received tacrolimus (0.5 mg/kg) for 14 days and were assigned to 4 groups: controls (CTRL) received no conditioning; ASC-group received CTLA4-Ig (10 mg/kg body weight i.p. postoperative day [POD] 2, 4, 7) and donor ASCs (1 × 106 iv, POD 2, 4, 7, 15, 28); the ASC-cyclophosphamide (CYP)-group received CTLA4-Ig, ASC plus cyclophosphamide (50 mg/kg ip, POD 3); the ASC-ALS-group received CTLA4-Ig, ASCs plus ALS (500 µL ip, POD 1, 5). Banff grade III or 120 days were endpoints. ASCs suppressed alloresponse in vitro. Median rejection-free VCA survival was 28 days in CTRL (n = 7), 34 in ASC (n = 6), and 27.5 in ASC-CYP (n = 4). In contrast, ASC-ALS achieved significantly longer, rejection-free VCA survival in 6/7 animals (86%), with persistent mixed donor-cell chimerism, and elevated systemic and allograft skin Tregs , with no signs of acute cellular rejection. Taken together, a regimen comprised of short-course tacrolimus, repeated CTLA4-Ig and ASC administration, combined with ALS, promotes long-term VCA survival without chronic immunosuppression.

中文翻译：

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脂肪来源的基质细胞疗法与短期非清髓性调节相结合可促进血管化复合同种异体移植的长期移植物耐受性。

慢性免疫抑制的风险限制了血管化复合同种异体移植 (VCA) 作为复杂组织缺损的重建选择的效用。我们评估了一种新颖的、可临床转化的、无辐射的调理方案，该方案将抗淋巴细胞血清 (ALS)、他克莫司和细胞毒性 T 淋巴细胞相关蛋白 4 免疫球蛋白 (CTLA4-Ig) 与脂肪来源的基质细胞 (ASC) 相结合，以允许 VCA 在没有长期全身免疫抑制的情况下存活。完全错配的大鼠后肢移植接受者接受他克莫司 (0.5 mg/kg) 治疗 14 天，并被分配到 4 组：对照组 (CTRL) 不接受条件反射；ASC 组接受 CTLA4-Ig（10 mg/kg 体重 ip 术后第 2、4、7 天）和供体 ASC（1 × 106 iv，POD 2、4、7、15、28）；ASC-环磷酰胺（CYP）组接受 CTLA4-Ig，ASC 加环磷酰胺（50 mg/kg ip，POD 3）；ASC-ALS 组接受 CTLA4-Ig、ASC 加 ALS（500 µL ip，POD 1、5）。班夫 III 级或 120 天是终点。ASCs 在体外抑制同种异体反应。中位无排斥 VCA 生存期在 CTRL 中为 28 天 (n = 7)，在 ASC 中为 34 天 (n = 6)，在 ASC-CYP 中为 27.5 (n = 4)。相比之下，ASC-ALS 在 6/7 的动物 (86%) 中实现了显着更长的无排斥 VCA 存活，具有持续的混合供体细胞嵌合现象，以及升高的全身和同种异体移植皮肤 Treg，没有急性细胞排斥的迹象。综上所述，由短疗程他克莫司、重复 CTLA4-Ig 和 ASC 给药以及 ALS 组成的方案可促进 VCA 的长期存活，而无需慢性免疫抑制。班夫 III 级或 120 天是终点。ASCs 在体外抑制同种异体反应。中位无排斥 VCA 生存期在 CTRL 中为 28 天 (n = 7)，在 ASC 中为 34 天 (n = 6)，在 ASC-CYP 中为 27.5 (n = 4)。相比之下，ASC-ALS 在 6/7 的动物 (86%) 中实现了显着更长的无排斥 VCA 存活，具有持续的混合供体细胞嵌合现象，以及升高的全身和同种异体移植皮肤 Treg，没有急性细胞排斥的迹象。综上所述，由短疗程他克莫司、重复 CTLA4-Ig 和 ASC 给药以及 ALS 组成的方案可促进 VCA 的长期存活，而无需慢性免疫抑制。班夫 III 级或 120 天是终点。ASCs 在体外抑制同种异体反应。中位无排斥 VCA 生存期在 CTRL 中为 28 天 (n = 7)，在 ASC 中为 34 天 (n = 6)，在 ASC-CYP 中为 27.5 (n = 4)。相比之下，ASC-ALS 在 6/7 的动物 (86%) 中实现了显着更长的无排斥 VCA 存活，具有持续的混合供体细胞嵌合现象，以及升高的全身和同种异体移植皮肤 Treg，没有急性细胞排斥的迹象。综上所述，由短疗程他克莫司、重复 CTLA4-Ig 和 ASC 给药以及 ALS 组成的方案可促进 VCA 的长期存活，而无需慢性免疫抑制。ASC-ALS 在 6/7 的动物 (86%) 中实现了显着更长的无排斥 VCA 存活，具有持久的混合供体细胞嵌合体，以及全身和同种异体移植皮肤 Tregs 升高，没有急性细胞排斥的迹象。综上所述，由短疗程他克莫司、重复 CTLA4-Ig 和 ASC 给药以及 ALS 组成的方案可促进 VCA 的长期存活，而无需慢性免疫抑制。ASC-ALS 在 6/7 的动物 (86%) 中实现了显着更长的无排斥 VCA 存活，具有持久的混合供体细胞嵌合体，以及全身和同种异体移植皮肤 Tregs 升高，没有急性细胞排斥的迹象。综上所述，由短疗程他克莫司、重复 CTLA4-Ig 和 ASC 给药以及 ALS 组成的方案可促进 VCA 的长期存活，而无需慢性免疫抑制。