OBJECTIVE Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1 (ROR1) is overexpressed in a subset of malignant cells. However, it remains unknown whether ROR1 is targetable in malignant mesothelioma (MM). Therefore, in this study, we investigated the effects of ROR1 inhibition in mesothelioma cells. MATERIALS AND METHODS Growth inhibition, colony formation, apoptosis, and mRNA/protein levels using siRNA-transfected MM cells were evaluated. Cluster analysis using Gene Expression Omnibus repository of transcriptomic information was also performed. RESULTS Our results indicated that in three (H2052, H2452, and MESO-1) among four MM cell lines, ROR1 inhibition had anti-proliferative and apoptotic effects and suppressed the activation of AKT and STAT3. Although growth inhibition by siROR1 was minimal in another mesothelioma cell line (H28), colony formation was significantly suppressed. Microarray, quantitative polymerase chain reaction, and Western blot analyses showed that there were differences in the suppression of mRNA and proteins between H2452 and H28 cells transfected with siROR1 compared with those transfected with control siRNA. Cluster analysis further showed that MM tumors had relatively high ROR1 expression, although the cluster in them was different from that in MM cell lines. Thymidylate synthase, a target of pemetrexed, was downregulated in H2452 cells transfected with siROR1. Accordingly, a combination of pemetrexed with siROR1 was found to be effective in the three MM cell lines we studied. CONCLUSION Our findings may provide novel therapeutic insight into the treatment of advanced MM.

中文翻译：

---

在恶性间皮瘤细胞中与培美曲塞联合靶向ROR1。

目的受体酪氨酸激酶样孤儿受体1（ROR1）在恶性细胞的一个子集中过表达。但是，ROR1是否可在恶性间皮瘤（MM）中靶向仍然是未知的。因此，在这项研究中，我们研究了间皮瘤细胞中ROR1抑制的作用。材料和方法评估了使用siRNA转染的MM细胞的生长抑制，集落形成，凋亡和mRNA /蛋白质水平。还使用转录组信息的基因表达综合库进行了聚类分析。结果我们的结果表明，在四个MM细胞系中的三个（H2052，H2452和MESO-1）中，ROR1抑制具有抗增殖和凋亡作用，并抑制AKT和STAT3的激活。尽管在另一间皮瘤细胞系（H28）中siROR1的生长抑制作用极小，集落形成被显着抑制。芯片，定量聚合酶链反应和蛋白质印迹分析表明，与对照siRNA转染的siROR1相比，转染si245的H2452和H28细胞在mRNA和蛋白质的抑制上存在差异。聚类分析进一步表明，MM肿瘤具有相对较高的ROR1表达，尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。培美曲塞的靶标胸苷酸合酶在转染siROR1的H2452细胞中被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。定量聚合酶链反应和蛋白质印迹分析表明，与对照siRNA相比，siROR1转染的H2452和H28细胞在mRNA和蛋白质的抑制上存在差异。聚类分析进一步表明，MM肿瘤具有相对较高的ROR1表达，尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。定量聚合酶链反应和蛋白质印迹分析表明，与对照siRNA相比，siROR1转染的H2452和H28细胞在mRNA和蛋白质的抑制上存在差异。聚类分析进一步表明，MM肿瘤具有相对较高的ROR1表达，尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。Western blot分析表明，与对照siRNA相比，siROR1转染的H2452和H28细胞在mRNA和蛋白的抑制上存在差异。聚类分析进一步表明，MM肿瘤具有相对较高的ROR1表达，尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。Western blot分析表明，与对照siRNA相比，siROR1转染的H2452和H28细胞在mRNA和蛋白的抑制上存在差异。聚类分析进一步表明，MM肿瘤具有相对较高的ROR1表达，尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。尽管它们中的簇与MM细胞系中的簇不同。在用siROR1转染的H2452细胞中，胸苷酸合酶（培美曲塞的靶标）被下调。因此，发现培美曲塞与siROR1的组合在我们研究的三种MM细胞系中有效。结论我们的发现可能为晚期MM的治疗提供新颖的治疗见解。