Multiple rodent and primate preclinical studies have advanced CAR T cells into the clinic. However, no single model accurately reflects the challenges of effective CAR T therapy in human cancer patients. To evaluate the effectiveness of next-generation CAR T cells that aim to overcome barriers to durable tumor elimination, we developed a system to evaluate CAR T cells in pet dogs with spontaneous cancer. Here we report on this system and the results of a pilot trial using CAR T cells to treat canine diffuse large B cell lymphoma (DLBCL). We designed and manufactured CD20-targeting, second-generation canine CAR T cells for functional evaluation in vitro and in vivo using lentivectors to parallel human CAR T cell manufacturing. A first-in-species trial of five dogs with DLBCL treated with CAR T was undertaken. Canine CAR T cells functioned in an antigen-specific manner and killed CD20+ targets. Circulating CAR T cells were detectable post-infusion, however, induction of canine anti-mouse antibodies (CAMA) was associated with CAR T cell loss. Specific selection pressure on CD20+ tumors was observed following CAR T cell therapy, culminating in antigen escape and emergence of CD20-disease. Patient survival times correlated with ex vivo product expansion. Altering product manufacturing improved transduction efficiency and skewed toward a memory-like phenotype of canine CAR T cells. Manufacturing of functional canine CAR T cells using a lentivector is feasible. Comparable challenges to effective CAR T cell therapy exist, indicating their relevance in informing future human clinical trial design.

中文翻译：

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建立使用自发性弥漫性大B细胞淋巴瘤的犬评估CAR T细胞治疗的模型系统。

多项啮齿动物和灵长类动物的临床前研究已将CAR T细胞进入临床。但是，没有单一模型能够准确反映出有效的CAR T疗法对人类癌症患者的挑战。为了评估旨在克服持久消除肿瘤的障碍的下一代CAR T细胞的有效性，我们开发了一种系统来评估患有自发性癌症的宠物狗中的CAR T细胞。在这里，我们报告该系统以及使用CAR T细胞治疗犬弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）的先导试验的结果。我们设计和制造了靶向CD20的第二代犬CAR T细胞，用于在体外和体内使用慢病毒载体平行进行人CAR T细胞制造的功能评估。进行了五只接受CAR T治疗的DLBCL犬的首次临床试验。犬CAR T细胞以抗原特异性方式起作用，并杀死了CD20 +靶标。输注后可检测到循环中的CAR T细胞，但是，犬抗小鼠抗体（CAMA）的诱导与CAR T细胞的丢失有关。在CAR T细胞治疗后，观察到对CD20 +肿瘤的特异性选择压力，最终导致抗原逃逸和CD20疾病的出现。患者的生存时间与离体产品的扩展相关。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。输注后可检测到循环中的CAR T细胞，但是，犬抗小鼠抗体（CAMA）的诱导与CAR T细胞的丢失有关。在CAR T细胞治疗后，观察到对CD20 +肿瘤的特异性选择压力，最终导致抗原逃逸和CD20疾病的出现。患者的生存时间与离体产品的扩展相关。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。输注后可检测到循环中的CAR T细胞，但是，犬抗小鼠抗体（CAMA）的诱导与CAR T细胞的丢失有关。在CAR T细胞治疗后，观察到对CD20 +肿瘤的特异性选择压力，最终导致抗原逃逸和CD20疾病的出现。患者的生存时间与离体产品的扩展相关。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。在CAR T细胞治疗后，观察到对CD20 +肿瘤的特异性选择压力，最终导致抗原逃逸和CD20疾病的出现。患者的生存时间与离体产品的扩展相关。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。在CAR T细胞治疗后，观察到对CD20 +肿瘤的特异性选择压力，最终导致抗原逃逸和CD20疾病的出现。患者的生存时间与离体产品的扩展相关。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。改变产品制造方式提高了转导效率，并倾向于犬类CAR T细胞的记忆型表型。使用慢病毒载体生产功能性犬CAR T细胞是可行的。有效CAR T细胞疗法存在可比的挑战，表明它们在为未来的人类临床试验设计提供信息方面具有相关性。