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Rapid detection of avian leukosis virus using a fluorescent microsphere immunochromatographic test strip assay.
Poultry Science ( IF 4.4 ) Pub Date : 2019-12-01 , DOI: 10.3382/ps/pez547 Huanan Wang 1 , Jianchi Guan 2 , Xiangnan Liu 2, 3 , Yue Shi 4 , Qiwen Wu 3 , Mengzhen Luo 3 , Yujun Zhu 5 , Zizengchen Wang 1 , Lefeng Wang 1 , Yu Pan 3
Poultry Science ( IF 4.4 ) Pub Date : 2019-12-01 , DOI: 10.3382/ps/pez547 Huanan Wang 1 , Jianchi Guan 2 , Xiangnan Liu 2, 3 , Yue Shi 4 , Qiwen Wu 3 , Mengzhen Luo 3 , Yujun Zhu 5 , Zizengchen Wang 1 , Lefeng Wang 1 , Yu Pan 3
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We developed a rapid fluorescent microsphere immunochromatographic test strip (FM-ICTS) assay for the quantitative detection of avian leukosis virus (ALV). A monoclonal antibody specific for the ALV major capsid protein encoded by the gag gene was coupled to label fluorescent microspheres. ALV antibodies were coated on a nitrocellulose membrane to prepare a test line for sample detection. The fluorescence signals of the test and control lines can be read either visually by exposure to UV light or using a fluorescence analyzer. ALV could be detected quantitatively using the ratio of fluorescence signals of the test and control lines (T/C). The assay threshold was determined as a T/C value of 0.0606. The fitting curve equation was established between 1 and 2,048 ng/mL P27 protein with an r2 value of 0.9998. The assay showed no cross reactivity with Newcastle disease virus, infectious laryngotracheitis virus, infectious bronchitis virus, Marek's disease virus, infectious bursal disease, Reoviridae virus, or avian influenza virus. The repeatability was satisfactory with an overall average CV of 8.65%. The Kappa coefficient between a commercial ELISA kit was 0.7031 using clinical chicken meconium samples. Thus, a simple, rapid, sensitive, and specific fluorescent microsphere immunochromatographic test strip was developed based on specific anti-capsid protein p27 monoclonal antibodies.
中文翻译:
使用荧光微球免疫层析试纸法快速检测禽白血病病毒。
我们开发了一种快速荧光微球免疫层析试纸 (FM-ICTS) 测定法,用于定量检测禽白血病病毒 (ALV)。一种对由 gag 基因编码的 ALV 主要衣壳蛋白特异的单克隆抗体与标记荧光微球偶联。将ALV抗体包被在硝酸纤维素膜上以制备用于样品检测的测试线。测试线和对照线的荧光信号可以通过暴露在紫外光下或使用荧光分析仪目测读取。可以使用测试线和对照线的荧光信号比值 (T/C) 定量检测 ALV。测定阈值被确定为 0.0606 的 T/C 值。拟合曲线方程建立在 1 和 2,048 ng/mL P27 蛋白之间,r2 值为 0.9998。该测定显示与新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性支气管炎病毒、马立克氏病病毒、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒科病毒或禽流感病毒没有交叉反应性。可重复性令人满意,总体平均 CV 为 8.65%。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。
更新日期:2020-04-17
中文翻译:
使用荧光微球免疫层析试纸法快速检测禽白血病病毒。
我们开发了一种快速荧光微球免疫层析试纸 (FM-ICTS) 测定法,用于定量检测禽白血病病毒 (ALV)。一种对由 gag 基因编码的 ALV 主要衣壳蛋白特异的单克隆抗体与标记荧光微球偶联。将ALV抗体包被在硝酸纤维素膜上以制备用于样品检测的测试线。测试线和对照线的荧光信号可以通过暴露在紫外光下或使用荧光分析仪目测读取。可以使用测试线和对照线的荧光信号比值 (T/C) 定量检测 ALV。测定阈值被确定为 0.0606 的 T/C 值。拟合曲线方程建立在 1 和 2,048 ng/mL P27 蛋白之间,r2 值为 0.9998。该测定显示与新城疫病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性支气管炎病毒、马立克氏病病毒、传染性法氏囊病、呼肠孤病毒科病毒或禽流感病毒没有交叉反应性。可重复性令人满意,总体平均 CV 为 8.65%。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。使用临床鸡胎粪样品的商业 ELISA 试剂盒之间的 Kappa 系数为 0.7031。因此,基于特异性抗衣壳蛋白p27单克隆抗体,研制了一种简单、快速、灵敏、特异的荧光微球免疫层析试纸条。