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Fabrication and characterization of extracellular matrix scaffolds obtained from adipose-derived stem cells
Methods ( IF 4.8 ) Pub Date : 2020-01-01 , DOI: 10.1016/j.ymeth.2019.07.004 Simone Riis 1 , Anne Cathrine Hansen 1 , Lonnie Johansen 1 , Kaya Lund 1 , Cecilie Pedersen 1 , Aikaterini Pitsa 1 , Kathrine Hyldig 1 , Vladimir Zachar 1 , Trine Fink 1 , Cristian Pablo Pennisi 1
Methods ( IF 4.8 ) Pub Date : 2020-01-01 , DOI: 10.1016/j.ymeth.2019.07.004 Simone Riis 1 , Anne Cathrine Hansen 1 , Lonnie Johansen 1 , Kaya Lund 1 , Cecilie Pedersen 1 , Aikaterini Pitsa 1 , Kathrine Hyldig 1 , Vladimir Zachar 1 , Trine Fink 1 , Cristian Pablo Pennisi 1
Affiliation
Chronic non-healing wounds are detrimental for the quality of life of the affected individuals and represent a major burden for the health care systems. Adipose-derived stem cells (ASCs) are being investigated for the development of novel treatments of chronic wounds, as they have shown several positive effects on wound healing. While these effects appear to be mediated by the release of soluble factors, it is has also become apparent that the extracellular matrix (ECM) deposited by ASCs is essential in several phases of the wound healing process. In this work, we describe an approach to produce ECM scaffolds derived from ASCs in culture. Upon growth of ASCs into an overconfluent cell layer, a detergent-based cell extraction approach is applied to remove the cellular components. The extraction is followed by an enzymatic treatment to remove the residual DNA. The resultant cell-derived scaffolds are depleted of cellular components, display low DNA remnant, and retain the native fibrillar organization of the ECM. Analysis of the molecular composition of the ECM scaffolds revealed that they are composed of collagens type I and III, and fibronectin. The decellularized scaffolds represent a substrate that supports adhesion and proliferation of primary human fibroblasts and dermal microvascular endothelial cells, indicating their potential as platforms for wound healing studies.
中文翻译:
从脂肪干细胞获得的细胞外基质支架的制备和表征
慢性不愈合伤口不利于受影响个体的生活质量,并且是医疗保健系统的主要负担。脂肪来源的干细胞 (ASC) 正在研究用于开发慢性伤口的新型治疗方法,因为它们已显示出对伤口愈合的几种积极作用。虽然这些影响似乎是由可溶性因子的释放介导的,但很明显,ASC 沉积的细胞外基质 (ECM) 在伤口愈合过程的几个阶段是必不可少的。在这项工作中,我们描述了一种从文化中的 ASC 产生 ECM 支架的方法。在 ASC 生长到过度融合的细胞层后,应用基于洗涤剂的细胞提取方法去除细胞成分。提取后进行酶处理以去除残留的 DNA。由此产生的细胞衍生支架耗尽了细胞成分,显示出低 DNA 残留,并保留了 ECM 的天然纤维组织。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。
更新日期:2020-01-01
中文翻译:
从脂肪干细胞获得的细胞外基质支架的制备和表征
慢性不愈合伤口不利于受影响个体的生活质量,并且是医疗保健系统的主要负担。脂肪来源的干细胞 (ASC) 正在研究用于开发慢性伤口的新型治疗方法,因为它们已显示出对伤口愈合的几种积极作用。虽然这些影响似乎是由可溶性因子的释放介导的,但很明显,ASC 沉积的细胞外基质 (ECM) 在伤口愈合过程的几个阶段是必不可少的。在这项工作中,我们描述了一种从文化中的 ASC 产生 ECM 支架的方法。在 ASC 生长到过度融合的细胞层后,应用基于洗涤剂的细胞提取方法去除细胞成分。提取后进行酶处理以去除残留的 DNA。由此产生的细胞衍生支架耗尽了细胞成分,显示出低 DNA 残留,并保留了 ECM 的天然纤维组织。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。ECM 支架的分子组成分析表明,它们由 I 型和 III 型胶原蛋白以及纤连蛋白组成。脱细胞支架代表了支持原代人成纤维细胞和真皮微血管内皮细胞粘附和增殖的基质,表明它们作为伤口愈合研究平台的潜力。