The long noncoding RNA growth-arrest specific 5 (GAS5) is a suppressor of many cancers. However, the role and mechanism of action of GAS5 in hepatitis B virus (HBV)-related hepatocellular carcinoma (HCC) remain unclear. Here, the expression of hepatitis B virus x gene (HBx) mRNA and GAS5 was assessed by qRT–PCR, and western blot analysis was performed to determine the protein expression levels. In addition, the cell viability and invasion of cells were confirmed using MTT assay and Transwell assay, respectively. The DNA methylation level of GAS5 was measured by methylation-specific PCR. Moreover, RIP assay and RNA pull down assay were carried out to examine the combination of Y-box-binding protein 1 (YBX1) and GAS5. First, our data proved that HBx is increased, while GAS5 is decreased in HCC cell lines. Subsequently, we found that HBx facilitates HCC cell viability and invasion by inhibiting GAS5 expression. Then, we further clarified that HBx induces the DNA methylation of GAS5 by promoting methyltransferase expression, thereby suppressing GAS5 expression. Furthermore, GAS5 binds YBX1 and promotes YBX1 and p21 expression. Finally, the functional analysis revealed that the upregulation of GAS5 could attenuate cell viability and invasion by boosting p21 expression via binding YBX1. Overall, our results demonstrated that HBx promotes HCC progression by inducing GAS5 methylation to reduce its expression. The upregulation of GAS5 suppressed HBV-related HCC by activating YBX1/p21 signaling. Our data provide novel evidence supporting the potential of GAS5 as a treatment target in HBV-related HCC.

长链非编码 RNA 生长阻滞特异性 5 (GAS5) 是许多癌症的抑制因子。然而，GAS5在乙型肝炎病毒（HBV）相关肝细胞癌（HCC）中的作用和作用机制仍不清楚。在这里，通过 qRT-PCR 评估乙型肝炎病毒 x 基因 (HBx) mRNA 和 GAS5 的表达，并进行蛋白质印迹分析以确定蛋白质表达水平。此外，分别使用MTT法和Transwell法确认细胞活力和细胞侵袭。通过甲基化特异性PCR测量GAS5的DNA甲基化水平。此外，进行 RIP 测定和 RNA 下拉测定以检查 Y-box 结合蛋白 1 (YBX1) 和 GAS5 的组合。首先，我们的数据证明 HCC 细胞系中 HBx 增加，而 GAS5 减少。随后，我们发现 HBx 通过抑制 GAS5 表达来促进 HCC 细胞活力和侵袭。然后，我们进一步阐明HBx通过促进甲基转移酶表达诱导GAS5的DNA甲基化，从而抑制GAS5的表达。此外，GAS5 结合 YBX1 并促进 YBX1 和 p21 的表达。最后，功能分析表明，GAS5 的上调可以通过结合 YBX1 增强 p21 表达来减弱细胞活力和侵袭。总体而言，我们的结果表明 HBx 通过诱导 GAS5 甲基化以降低其表达来促进 HCC 进展。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。我们进一步阐明HBx通过促进甲基转移酶表达诱导GAS5的DNA甲基化，从而抑制GAS5的表达。此外，GAS5 结合 YBX1 并促进 YBX1 和 p21 的表达。最后，功能分析表明，GAS5 的上调可以通过结合 YBX1 增强 p21 表达来减弱细胞活力和侵袭。总体而言，我们的结果表明 HBx 通过诱导 GAS5 甲基化以降低其表达来促进 HCC 进展。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。我们进一步阐明HBx通过促进甲基转移酶表达诱导GAS5的DNA甲基化，从而抑制GAS5的表达。此外，GAS5 结合 YBX1 并促进 YBX1 和 p21 的表达。最后，功能分析表明，GAS5 的上调可以通过结合 YBX1 增强 p21 表达来减弱细胞活力和侵袭。总体而言，我们的结果表明 HBx 通过诱导 GAS5 甲基化以降低其表达来促进 HCC 进展。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。GAS5 结合 YBX1 并促进 YBX1 和 p21 的表达。最后，功能分析表明，GAS5 的上调可以通过结合 YBX1 增强 p21 表达来减弱细胞活力和侵袭。总体而言，我们的结果表明 HBx 通过诱导 GAS5 甲基化以降低其表达来促进 HCC 进展。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。GAS5 结合 YBX1 并促进 YBX1 和 p21 的表达。最后，功能分析表明，GAS5 的上调可以通过结合 YBX1 增强 p21 表达来减弱细胞活力和侵袭。总体而言，我们的结果表明 HBx 通过诱导 GAS5 甲基化以降低其表达来促进 HCC 进展。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。GAS5 的上调通过激活 YBX1/p21 信号通路抑制 HBV 相关的 HCC。我们的数据提供了支持 GAS5 作为 HBV 相关 HCC 治疗靶点的潜力的新证据。