Propofol, a general intravenous anesthetic, has been demonstrated to cause a profound neuroapoptosis in the developing brain followed by long-term neurocognitive impairment. Our study aimed to examine the neuroprotective effect of neuronal PAS domain protein 4 (NPAS4), an activity-dependent neuron-specific transcription factor, on propofol-induced neurotoxicity in hippocampal neuronal HT22 cells. The differentially expressed genes in HT22 cells after treatment with propofol were screened from Gene Expression Omnibus dataset GSE106799. NPAS4 expression in HT22 cells treated with different doses of propofol was investigated by qRT-PCR and Western blot analysis. Cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) release, caspase-3 activity, and apoptosis were evaluated by MTT, a LDH-Cytotoxicity Assay Kit, a Caspase-3 Colorimetric Assay Kit, and TUNEL assay, respectively. The protein levels of LC3-I, LC3-II, Beclin 1, p62 and NPAS4 were detected using Western blot analysis. Propofol treatment concentration-dependently decreased NPAS4 expression in HT22 cells. Propofol treatment inhibited cell viability, increased LDH release and caspase-3 activity, and induced apoptosis and autophagy in HT22 cells. NPAS4 overexpression suppressed propofol-induced cell injury and autophagy in HT22 cells. Mechanistically, autophagy agonist rapamycin attenuated the neuroprotective effect of NPAS4 in propofol-treated HT22 cells. In conclusion, NAPS4 overexpression protected hippocampal neuronal HT22 cells against propofol-induced neurotoxicity by reducing autophagy.

丙泊酚是一种通用静脉麻醉剂，已被证明会在发育中的大脑中引起严重的神经细胞凋亡，然后是长期的神经认知障碍。我们的研究旨在检查神经元 PAS 结构域蛋白 4 (NPAS4)（一种活性依赖性神经元特异性转录因子）对丙泊酚诱导的海马神经元 HT22 细胞神经毒性的神经保护作用。从基因表达综合数据集GSE106799中筛选丙泊酚处理后HT22细胞差异表达基因。通过qRT-PCR和蛋白质印迹分析研究用不同剂量丙泊酚处理的HT22细胞中NPAS4的表达。通过 MTT、LDH-细胞毒性测定试剂盒、Caspase-3 比色测定试剂盒和 TUNEL 测定法评估细胞活力、乳酸脱氢酶 (LDH) 释放、caspase-3 活性和细胞凋亡，分别。使用蛋白质印迹分析检测 LC3-I、LC3-II、Beclin 1、p62 和 NPAS4 的蛋白质水平。丙泊酚处理浓度依赖性地降低 HT22 细胞中 NPAS4 的表达。丙泊酚处理抑制细胞活力，增加 LDH 释放和 caspase-3 活性，并诱导 HT22 细胞凋亡和自噬。NPAS4过表达抑制了HT22细胞中丙泊酚诱导的细胞损伤和自噬。从机制上讲，自噬激动剂雷帕霉素减弱了 NPAS4 在丙泊酚处理的 HT22 细胞中的神经保护作用。总之，NAPS4 过表达通过减少自噬保护海马神经元 HT22 细胞免受丙泊酚诱导的神经毒性。丙泊酚处理浓度依赖性地降低 HT22 细胞中 NPAS4 的表达。丙泊酚处理抑制细胞活力，增加 LDH 释放和 caspase-3 活性，并诱导 HT22 细胞凋亡和自噬。NPAS4 过表达抑制了丙泊酚诱导的 HT22 细胞损伤和自噬。从机制上讲，自噬激动剂雷帕霉素减弱了 NPAS4 在丙泊酚处理的 HT22 细胞中的神经保护作用。总之，NAPS4 过表达通过减少自噬保护海马神经元 HT22 细胞免受丙泊酚诱导的神经毒性。丙泊酚处理浓度依赖性地降低 HT22 细胞中 NPAS4 的表达。丙泊酚处理抑制细胞活力，增加 LDH 释放和 caspase-3 活性，并诱导 HT22 细胞凋亡和自噬。NPAS4 过表达抑制了丙泊酚诱导的 HT22 细胞损伤和自噬。从机制上讲，自噬激动剂雷帕霉素减弱了 NPAS4 在丙泊酚处理的 HT22 细胞中的神经保护作用。总之，NAPS4 过表达通过减少自噬保护海马神经元 HT22 细胞免受丙泊酚诱导的神经毒性。NPAS4 过表达抑制了丙泊酚诱导的 HT22 细胞损伤和自噬。从机制上讲，自噬激动剂雷帕霉素减弱了 NPAS4 在丙泊酚处理的 HT22 细胞中的神经保护作用。总之，NAPS4 过表达通过减少自噬保护海马神经元 HT22 细胞免受丙泊酚诱导的神经毒性。NPAS4 过表达抑制了丙泊酚诱导的 HT22 细胞损伤和自噬。从机制上讲，自噬激动剂雷帕霉素减弱了 NPAS4 在丙泊酚处理的 HT22 细胞中的神经保护作用。总之，NAPS4 过表达通过减少自噬保护海马神经元 HT22 细胞免受丙泊酚诱导的神经毒性。