Cutaneous squamous cell carcinoma (CSCC) is a malignant tumor that originates from keratinocytes in the epidermis or appendage. Traditional Chinese medicine Huaier has anti-tumor activity in various malignancies. Little is known about the role of Huaier in CSCC. Here, we investigated the function of Huaier in CSCC. We treated CSCC cell line (SCL-1 and A431) with a series of concentration gradients of Huaier to examine the half maximal inhibitory concentration (IC50) of Huaier on SCL-1 and A431 cells. The IC50 of Huaier on growth of SCL-1 and A431 cells were 6.96 and 7.57 mg/mL, respectively. Moreover, Huaier reduced the methylation levels of CDKN2A and TP53, and enhanced the expression of CDKN2A and TP53 in SCL-1 and A431 cells in a dosage-dependent manner. The expression of DNA methyltransferase DNMT1 was severely repressed by Huaier treatment in SCL-1 and A431 cells. DNMT1 overexpression enhanced the methylation levels of CDKN2A and TP53, and suppressed the expression of CDKN2A and TP53 in Huaier-treated SCL-1 and A431 cells. Huaier treatment inhibited proliferation, migration, and invasion of SCL-1 and A431 cells. However, inhibition of CDKN2A or TP53 reversed the influence of Huaier treatment on proliferation, migration, and invasion of CSCC cells. In conclusion, our data demonstrate that Huaier inhibits proliferation, migration, and invasion of CSCC cells by regulating DNA methylation of CDKN2A and TP53, thereby attenuating the progression of CSCC. Thus, Huaier extract may act as a drug for treating CSCC.

皮肤鳞状细胞癌（CSCC）是一种起源于表皮或附属器角质形成细胞的恶性肿瘤。中药怀尔对多种恶性肿瘤具有抗肿瘤活性。人们对怀尔在 CSCC 中的作用知之甚少。在这里，我们调查了怀尔在 CSCC 中的作用。我们用一系列槐耳浓度梯度处理CSCC细胞系（SCL-1和A431），以检测槐耳对SCL-1和A431细胞的半数抑制浓度（IC50）。槐耳对SCL-1和A431细胞生长的IC50分别为6.96和7.57 mg/mL。此外，槐耳降低CDKN2A和TP53的甲基化水平，并以剂量​​依赖性方式增强SCL-1和A431细胞中CDKN2A和TP53的表达。槐耳处理严重抑制了SCL-1和A431细胞中DNA甲基转移酶DNMT1的表达。DNMT1 过表达增强了 CDKN2A 和 TP53 的甲基化水平，并抑制了槐耳处理的 SCL-1 和 A431 细胞中 CDKN2A 和 TP53 的表达。槐耳治疗抑制了SCL-1和A431细胞的增殖、迁移和侵袭。然而，CDKN2A 或 TP53 的抑制逆转了槐耳治疗对 CSCC 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。总之，我们的数据表明槐耳通过调节 CDKN2A 和 TP53 的 DNA 甲基化来抑制 CSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭，从而减缓 CSCC 的进展。因此，槐耳提取物可作为治疗 CSCC 的药物。DNMT1 过表达增强了 CDKN2A 和 TP53 的甲基化水平，并抑制了槐耳处理的 SCL-1 和 A431 细胞中 CDKN2A 和 TP53 的表达。槐耳处理抑制SCL-1和A431细胞的增殖、迁移和侵袭。然而，CDKN2A 或 TP53 的抑制逆转了槐耳治疗对 CSCC 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。总之，我们的数据表明槐耳通过调节 CDKN2A 和 TP53 的 DNA 甲基化来抑制 CSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭，从而减缓 CSCC 的进展。因此，槐耳提取物可作为治疗 CSCC 的药物。DNMT1 过表达增强了 CDKN2A 和 TP53 的甲基化水平，并抑制了槐耳处理的 SCL-1 和 A431 细胞中 CDKN2A 和 TP53 的表达。槐耳治疗抑制了SCL-1和A431细胞的增殖、迁移和侵袭。然而，CDKN2A或TP53的抑制逆转了槐耳治疗对CSCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。总之，我们的数据表明槐耳通过调节 CDKN2A 和 TP53 的 DNA 甲基化来抑制 CSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭，从而减缓 CSCC 的进展。因此，槐耳提取物可作为治疗 CSCC 的药物。CDKN2A 或 TP53 的抑制逆转了槐耳治疗对 CSCC 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。总之，我们的数据表明槐耳通过调节 CDKN2A 和 TP53 的 DNA 甲基化来抑制 CSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭，从而减缓 CSCC 的进展。因此，槐耳提取物可作为治疗 CSCC 的药物。CDKN2A 或 TP53 的抑制逆转了槐耳治疗对 CSCC 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。总之，我们的数据表明槐耳通过调节 CDKN2A 和 TP53 的 DNA 甲基化来抑制 CSCC 细胞的增殖、迁移和侵袭，从而减缓 CSCC 的进展。因此，槐耳提取物可作为治疗 CSCC 的药物。