Abstract

Chondrocyte apoptosis contributes to osteoarthritis, while miR-146a is a critical player in chondrocyte apoptosis. Our bioinformatics analysis showed that miR-146a may bind with long non-coding RNA (lncRNA) CALML3 antisense RNA 1 (CALML3-AS1). Our study was therefore carried out to investigate the interactions between lncRNA CALML3-AS1 and miR-146a in osteoarthritis. This study included 66 osteoarthritis patients who were admitted at Shanxi People’s Hospital from July 2016 to June 2019. Transfections were performed to analyse gene interactions. RT-qPCR and Western blot were performed to determine the expression levels of gene and protein, respectively. Cell apoptosis of chondrocytes induced by lipopolysaccharide (LPS) was analysed by cell apoptosis assay. We found that CALML3-AS1 was downregulated, while miR-146a was upregulated in osteoarthritis. However, no significant correlation was found between them. In addition, overexpression of CALML3-AS1 or miR-146a did not affect the expression of each other. However, overexpression of CALML3-AS1 resulted in the upregulation of Smad family member 4 (Smad4), a downstream target of miR-146a. We also found that the expression of miR-146a and Smad4 were negatively correlated, while the correlation between CALML3-AS1 and smad4 was not significant. In cell apoptosis assay, overexpression of CALML3-AS1 and Smad4 resulted in decreased proliferation of chondrocytes. MiR-146a played an opposite role and reduced the effects of overexpression of CALML3-AS1 and Smad4. Therefore, CALML3-AS1 may regulate chondrocyte apoptosis by acting as a sponge for miR-146a to upregulate Smad4.

摘要

软骨细胞凋亡导致骨关节炎，而 miR-146a 是软骨细胞凋亡的关键参与者。我们的生物信息学分析表明，miR-146a 可能与长链非编码 RNA (lncRNA) CALML3 反义 RNA 1 (CALML3-AS1) 结合。因此，我们的研究旨在研究 lncRNA CALML3-AS1 和 miR-146a 在骨关节炎中的相互作用。本研究纳入了 2016 年 7 月至 2019 年 6 月在山西省人民医院收治的 66 名骨关节炎患者。通过转染分析基因相互作用。分别进行 RT-qPCR 和蛋白质印迹以确定基因和蛋白质的表达水平。通过细胞凋亡试验分析脂多糖（LPS）诱导的软骨细胞的细胞凋亡。我们发现 CALML3-AS1 下调，而 miR-146a 在骨关节炎中上调。但是，它们之间没有发现显着的相关性。此外，CALML3-AS1 或 miR-146a 的过表达不影响彼此的表达。然而，CALML3-AS1 的过表达导致 Smad 家族成员 4 (Smad4) 的上调，这是 miR-146a 的下游靶标。我们还发现miR-146a和Smad4的表达呈负相关，而CALML3-AS1和smad4的相关性不显着。在细胞凋亡测定中，CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 或 miR-146a 的过表达不影响彼此的表达。然而，CALML3-AS1 的过表达导致 Smad 家族成员 4 (Smad4) 的上调，这是 miR-146a 的下游靶标。我们还发现miR-146a和Smad4的表达呈负相关，而CALML3-AS1和smad4的相关性不显着。在细胞凋亡测定中，CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 或 miR-146a 的过表达不影响彼此的表达。然而，CALML3-AS1 的过表达导致 Smad 家族成员 4 (Smad4) 的上调，这是 miR-146a 的下游靶标。我们还发现miR-146a和Smad4的表达呈负相关，而CALML3-AS1和smad4的相关性不显着。在细胞凋亡测定中，CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 的过表达导致 Smad 家族成员 4 (Smad4) 的上调，这是 miR-146a 的下游靶标。我们还发现miR-146a和Smad4的表达呈负相关，而CALML3-AS1和smad4的相关性不显着。在细胞凋亡测定中，CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 的过表达导致 Smad 家族成员 4 (Smad4) 的上调，这是 miR-146a 的下游靶标。我们还发现miR-146a和Smad4的表达呈负相关，而CALML3-AS1和smad4的相关性不显着。在细胞凋亡测定中，CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。CALML3-AS1 和 Smad4 的过表达导致软骨细胞增殖减少。MiR-146a 起相反的作用并降低了 CALML3-AS1 和 Smad4 过表达的影响。因此，CALML3-AS1 可能通过充当 miR-146a 的海绵上调 Smad4 来调节软骨细胞凋亡。