Septic shock is the archetypal clinical setting in which extensive crosstalk between inflammation and coagulation dysregulates the latter. The main anticoagulant systems are systematically impaired, depleted, and/or downregulated. Protein Z-dependent protease inhibitor (ZPI) is an anticoagulant serpin that not only targets coagulation factors Xa and XIa but also acts as an acute phase reactant whose plasma concentration rises in inflammatory settings. The objective of the present study was to assess the plasma ZPI antigen level in a cohort of patients suffering from septic shock with or without overt-disseminated intravascular coagulation (DIC). The plasma ZPI antigen level was approximately 2.5-fold higher in the patient group (n = 100; 38 with DIC and 62 without) than in healthy controls (n = 31). The elevation's magnitude did not appear to depend on the presence/absence of DIC. Furthermore, Western blots revealed the presence of cleaved ZPI in plasma from patients with severe sepsis, independently of the DIC status. In vitro, ZPI was proteolytically inactivated by purified neutrophil elastase (NE) and by NE on the surface of neutrophil extracellular traps (NETs). The electrophoretic pattern of ZPI after NE-catalyzed proteolysis was very similar to that resulting from the clotting process—suggesting that the cleaved ZPI observed in severe sepsis plasma is devoid of anticoagulant activity. Taken as a whole, our results (1) suggest that NE is involved in ZPI inactivation during sepsis, and (2) reveal a novel putative mechanism for the procoagulant activity of NETs in immunothrombosis.

中文翻译：

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嗜中性粒细胞弹性蛋白酶对蛋白 Z 依赖性蛋白酶抑制剂的蛋白水解失活可能促进脓毒症中嗜中性粒细胞胞外陷阱的促凝活性

感染性休克是典型的临床环境，其中炎症和凝血之间的广泛串扰导致后者失调。主要抗凝系统系统性受损、耗尽和/或下调。蛋白 Z 依赖性蛋白酶抑制剂 (ZPI) 是一种抗凝血丝氨酸蛋白酶抑制剂，它不仅针对凝血因子 Xa 和 XIa，而且还充当急性期反应物，其血浆浓度在炎症环境中升高。本研究的目的是评估一组患有感染性休克伴或不伴显性弥散性血管内凝血 (DIC) 的患者的血浆 ZPI 抗原水平。患者组（n = 100；38 例有 DIC，62 例没有）的血浆 ZPI 抗原水平比健康对照组 (n = 31) 高约 2.5 倍。高度' s 的大小似乎并不取决于 DIC 的存在/不存在。此外，Western blots 显示在严重脓毒症患者的血浆中存在裂解的 ZPI，与 DIC 状态无关。在体外，ZPI 被纯化的中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 和中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 表面的 NE 蛋白水解灭活。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。Western blots 显示在严重脓毒症患者的血浆中存在裂解的 ZPI，与 DIC 状态无关。在体外，ZPI 被纯化的中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 和中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 表面的 NE 蛋白水解灭活。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。Western blots 显示在严重脓毒症患者的血浆中存在裂解的 ZPI，与 DIC 状态无关。在体外，ZPI 被纯化的中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 和中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 表面的 NE 蛋白水解灭活。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。ZPI 被纯化的嗜中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 和嗜中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 表面的 NE 蛋白水解灭活。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。ZPI 被纯化的嗜中性粒细胞弹性蛋白酶 (NE) 和嗜中性粒细胞胞外陷阱 (NETs) 表面的 NE 蛋白水解灭活。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。NE 催化蛋白水解后 ZPI 的电泳模式与凝血过程产生的电泳模式非常相似——这表明在严重脓毒症血浆中观察到的裂解 ZPI 没有抗凝活性。总的来说，我们的结果 (1) 表明 NE 参与了脓毒症期间 ZPI 的失活，并且 (2) 揭示了 NET 在免疫血栓形成中促凝活性的新推定机制。