Abstract—

The work is aimed at the synthesis and analysis from NS4A of hepatitis C virus (HCV) antigen peptide fragment that contains a conserved B-cell and T-helper epitopes. The 24-mer peptide VIVGRIILSGRPAVIPDREVLYRK-NH2, which contains the main immunogenic site 24–46 of HCV NS4A antigen (corresponding to the 1681–1703 amino acid residues of the HCV polypeptide), subtype 1b, has been prepared via solid-phase synthesis according to the Fmoc-protocol. Particles with diameters of 73 ± 10 nm (30%) and 236 ± 5 nm (70%) have been detected in the water solution of the highly purified peptide (0.5 mg/mL) by dynamic light scattering. The polydispersity index of 0.377 ± 0.012 implies the existence of heterogeneity because of the aggregation of the peptide molecules. The ζ-potential of the peptide aggregates has been determined as 7.0 ± 0.5 mV by means of electrophoretic light scattering. These data confirm the possibility for the development of a nanoscale liposome form of the peptide preparation. Immunoreactivity of the synthesized highly purified peptide has been studied with the use of blood sera of patients with chronic hepatitis C. Antipeptide immunoglobulins G have been detected in 41.7% of serum samples. Thus, this peptide has been shown to reproduce at least one B-epitope, to which antibodies are raised during natural HCV infection. The synthesized 24-mer peptide is a promising candidate for further research and for use as a potential immunogen for the design of a nanoscale therapeutic immunogenic liposomal peptide composition with synthetic lipids as an adjuvant.

中文翻译：

---

丙型肝炎病毒NS4A多肽免疫原性片段的合成与特性分析

摘要——

这项工作旨在从 NS4A 合成和分析包含保守 B 细胞和 T 辅助表位的丙型肝炎病毒 (HCV) 抗原肽片段。24-mer 肽 VIVGRIILSGRPAVIPDREVLYRK-NH2 包含 HCV NS4A 抗原的主要免疫原位点 24-46（对应于 HCV 多肽的 1681-1703 个氨基酸残基），亚型 1b，已根据固相合成制备到 Fmoc 协议。通过动态光散射在高度纯化的肽 (0.5 mg/mL) 的水溶液中检测到直径为 73 ± 10 nm (30%) 和 236 ± 5 nm (70%) 的颗粒。0.377 ± 0.012 的多分散指数意味着由于肽分子的聚集而存在异质性。肽聚集体的 ζ 电位已确定为 7.0 ± 0。5 mV 通过电泳光散射。这些数据证实了开发纳米级脂质体形式的肽制剂的可能性。使用慢性丙型肝炎患者的血清研究了合成的高度纯化肽的免疫反应性。在 41.7% 的血清样品中检测到抗肽免疫球蛋白 G。因此，该肽已被证明可复制至少一个 B 表位，在自然 HCV 感染期间会针对该表位产生抗体。合成的 24 聚体肽是进一步研究的有希望的候选者，并可用作潜在的免疫原，用于设计以合成脂质作为佐剂的纳米级治疗性免疫原性脂质体肽组合物。这些数据证实了开发纳米级脂质体形式的肽制剂的可能性。使用慢性丙型肝炎患者的血清研究了合成的高度纯化肽的免疫反应性。在 41.7% 的血清样品中检测到抗肽免疫球蛋白 G。因此，该肽已被证明可复制至少一个 B 表位，在自然 HCV 感染期间会针对该表位产生抗体。合成的 24 聚体肽是进一步研究的有希望的候选者，并可用作潜在的免疫原，用于设计以合成脂质作为佐剂的纳米级治疗性免疫原性脂质体肽组合物。这些数据证实了开发纳米级脂质体形式的肽制剂的可能性。使用慢性丙型肝炎患者的血清研究了合成的高度纯化肽的免疫反应性。在 41.7% 的血清样品中检测到抗肽免疫球蛋白 G。因此，该肽已被证明可复制至少一个 B 表位，在自然 HCV 感染期间会针对该表位产生抗体。合成的 24 聚体肽是进一步研究的有希望的候选者，并可用作潜在的免疫原，用于设计以合成脂质作为佐剂的纳米级治疗性免疫原性脂质体肽组合物。使用慢性丙型肝炎患者的血清研究了合成的高度纯化肽的免疫反应性。在 41.7% 的血清样品中检测到抗肽免疫球蛋白 G。因此，该肽已被证明可复制至少一个 B 表位，在自然 HCV 感染期间会针对该表位产生抗体。合成的 24 聚体肽是进一步研究的有希望的候选者，并可用作潜在的免疫原，用于设计以合成脂质作为佐剂的纳米级治疗性免疫原性脂质体肽组合物。使用慢性丙型肝炎患者的血清研究了合成的高度纯化肽的免疫反应性。在 41.7% 的血清样品中检测到抗肽免疫球蛋白 G。因此，该肽已被证明可复制至少一个 B 表位，在自然 HCV 感染期间会针对该表位产生抗体。合成的 24 聚体肽是进一步研究的有希望的候选者，并可用作潜在的免疫原，用于设计以合成脂质作为佐剂的纳米级治疗性免疫原性脂质体肽组合物。