In order to understand the transmission and virulence of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2), it is necessary to understand the functions of each of the gene products encoded in the viral genome. One feature of the SARS-CoV-2 genome that is not present in related, common coronaviruses is ORF10, a putative 38-amino acid protein-coding gene. Proteomic studies found that ORF10 binds to an E3 ubiquitin ligase containing Cullin-2, Rbx1, Elongin B, Elongin C, and ZYG11B (CRL2^ZYG11B). Since CRL2^ZYG11B mediates protein degradation, one possible role for ORF10 is to “hijack” CRL2^ZYG11B in order to target cellular, antiviral proteins for ubiquitylation and subsequent proteasomal degradation. Here, we investigated whether ORF10 hijacks CRL2^ZYG11B or functions in other ways, for example, as an inhibitor or substrate of CRL2^ZYG11B. While we confirm the ORF10−ZYG11B interaction and show that the N terminus of ORF10 is critical for it, we find no evidence that ORF10 is functioning to inhibit or hijack CRL2^ZYG11B. Furthermore, ZYG11B and its paralog ZER1 are dispensable for SARS-CoV-2 infection in cultured cells. We conclude that the interaction between ORF10 and CRL2^ZYG11B is not relevant for SARS-CoV-2 infection in vitro.

为了了解严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 的传播和毒力，有必要了解病毒基因组中编码的每个基因产物的功能。SARS-CoV-2 基因组的一个特征是 ORF10，这是一种推定的 38 个氨基酸的蛋白质编码基因，但在相关的常见冠状病毒中不存在。蛋白质组学研究发现 ORF10 与包含 Cullin-2、Rbx1、Elongin B、Elongin C 和 ZYG11B (CRL2 ^ZYG11B ) 的 E3 泛素连接酶结合。由于 CRL2 ^ZYG11B介导蛋白质降解，ORF10 的一种可能作用是“劫持”CRL2 ^ZYG11B，以靶向细胞抗病毒蛋白进行泛素化和随后的蛋白酶体降解。在这里，我们研究了 ORF10 是否劫持了 CRL2 ^ZYG11B或以其他方式发挥作用，例如作为 CRL2 ^ZYG11B的抑制剂或底物。虽然我们确认了 ORF10−ZYG11B 相互作用并表明 ORF10 的 N 末端对此至关重要，但我们没有发现任何证据表明 ORF10 具有抑制或劫持 CRL2 ^ZYG11B的功能。此外，ZYG11B 及其旁系同源物 ZER1 对于培养细胞中的 SARS-CoV-2 感染来说是可有可无的。^{我们的结论是，ORF10 和 CRL2 ZYG11B}之间的相互作用与体外 SARS-CoV-2 感染无关。