Here we present a modification of the widely used pET29 expression vector for use in rapid and straightforward parallel cloning via a gene replacement and Golden Gate strategy. The modification can be applied to other expression vectors for Gram-negative bacteria. We have used the modified vectors to clone large numbers of bacterial natural enzyme variants from genomic and metagenomic sources for applications in biocatalysis.

中文翻译：

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为高效无缝克隆定制的 pET 表达载体。

在这里，我们提出了一种对广泛使用的 pET29 表达载体的修改，用于通过基因替换和金门策略进行快速和直接的平行克隆。该修饰可应用于革兰氏阴性菌的其他表达载体。我们已经使用修饰的载体从基因组和宏基因组来源克隆了大量细菌天然酶变体，用于生物催化。