Abstract In the present work, an analytical procedure for spatial quantification of phosphorous in cancerous tissues by micro-XRF was developed. This new methodology based on fundamental parameter approach consists of evaluating the incoming microbeam excitation x-ray spectrum on the sample and the matrix effects. The former was determined through a spectral reconstruction technique, based on the scattering pattern of a thin standard plastic material and the latter with the assistance of two transmission monitor ionization chambers. The procedure was applied on fifteen samples of murine gland mammary adenocarcinoma fixed in paraffin. Slices of 30 μm of these samples were scanned at air atmosphere in areas of 5 mm × 5 mm with a spatial resolution of 20 μm. The acquisition time per pixel was 5s allowing a detection limit for phosphorous of 240 ppm w/w. The results showed that the technique is able to detect the elevation of the phosphorous content in tumour tissues, as it was previously reported in the literature using other techniques. In addition, the spatial resolution of the technique allowed associating this increment with areas composed mainly by active tumour cells that were previously identified by Haematoxylin staining. In these areas, phosphorous concentrations showed spatial variations probably associated with tumour metabolism. Thus, micro-XRF offers valuable information of P spatial distribution that could be useful to identify active tumour cells as well as to study of tumour growth and progression.

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同步加速器显微XRF分析癌组织中磷含量

摘要 在目前的工作中，开发了一种通过微型 XRF 对癌组织中的磷进行空间量化的分析程序。这种基于基本参数方法的新方法包括评估样品上传入的微束激发 X 射线光谱和基体效应。前者是通过光谱重建技术确定的，基于薄标准塑料材料的散射模式，后者在两个透射监测电离室的帮助下确定。该程序应用于石蜡固定的 15 份鼠腺乳腺癌样本。这些样品的 30 μm 切片在空气气氛中扫描 5 mm × 5 mm 的区域，空间分辨率为 20 μm。每个像素的采集时间为 5 秒，允许磷的检测限为 240 ppm w/w。结果表明，该技术能够检测肿瘤组织中磷含量的升高，正如之前使用其他技术在文献中报道的那样。此外，该技术的空间分辨率允许将此增量与主要由先前通过苏木精染色鉴定的活性肿瘤细胞组成的区域相关联。在这些区域，磷浓度显示出可能与肿瘤代谢相关的空间变化。因此，微 XRF 提供了 P 空间分布的有价值信息，可用于识别活跃的肿瘤细胞以及研究肿瘤的生长和进展。结果表明，该技术能够检测肿瘤组织中磷含量的升高，正如之前使用其他技术在文献中报道的那样。此外，该技术的空间分辨率允许将此增量与主要由先前通过苏木精染色鉴定的活性肿瘤细胞组成的区域相关联。在这些区域，磷浓度显示出可能与肿瘤代谢相关的空间变化。因此，micro-XRF 提供了有价值的 P 空间分布信息，可用于识别活跃的肿瘤细胞以及研究肿瘤的生长和进展。结果表明，该技术能够检测肿瘤组织中磷含量的升高，正如之前使用其他技术在文献中报道的那样。此外，该技术的空间分辨率允许将此增量与主要由先前通过苏木精染色鉴定的活性肿瘤细胞组成的区域相关联。在这些区域，磷浓度显示出可能与肿瘤代谢相关的空间变化。因此，micro-XRF 提供了有价值的 P 空间分布信息，可用于识别活跃的肿瘤细胞以及研究肿瘤的生长和进展。该技术的空间分辨率允许将此增量与主要由先前通过苏木精染色鉴定的活性肿瘤细胞组成的区域相关联。在这些区域，磷浓度显示出可能与肿瘤代谢相关的空间变化。因此，micro-XRF 提供了有价值的 P 空间分布信息，可用于识别活跃的肿瘤细胞以及研究肿瘤的生长和进展。该技术的空间分辨率允许将此增量与主要由先前通过苏木精染色鉴定的活性肿瘤细胞组成的区域相关联。在这些区域，磷浓度显示出可能与肿瘤代谢相关的空间变化。因此，micro-XRF 提供了有价值的 P 空间分布信息，可用于识别活跃的肿瘤细胞以及研究肿瘤的生长和进展。