Increasing cell culture productivity of recombinant proteins via process improvements is the primary focus for research groups within biologics manufacturing. Any recommendations to improve a manufacturing process obviously must be effective, but also be robust, scalable, and with product quality comparable to the original process. In this study, we report that three different GS−/− CHO cell lines developed in media containing a standard concentration of the selection agent methionine sulfoximine (MSX), but then exposed to increased MSX concentrations during seed train expansion, achieved titer increases of 10–19%. This result was observed in processes already considerably optimized. Expanding the cells with a higher MSX concentration improved cell line production stability with increased culture age. Production cultures in 500‐L and 1000‐L bioreactors replicated laboratory results using 5‐L bioreactors, demonstrating process robustness and scalability. Furthermore, product quality attributes of the final drug substance using the higher MSX process were comparable with those from cells expanded in media with the standard selection MSX concentration. Subsequent mechanistic investigations confirmed that the cells were not altered at the genetic level in terms of integration profiles or gene copy number, nor transcriptional levels of glutamine synthetase, heavy chain, or light chain genes. This study provides an effective and applicable strategy to improve the productivity of therapeutic proteins for biologics manufacturing.

中文翻译：

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增加的 MSX 水平提高了多个重组 GS CHO 细胞系的生物生产力和生产稳定性

通过工艺改进提高重组蛋白的细胞培养生产率是生物制剂制造中研究小组的主要关注点。任何改进制造过程的建议显然都必须有效，而且还必须稳健、可扩展，并且产品质量可与原始过程相媲美。在本研究中，我们报告了三种不同的 GS−/− CHO 细胞系在含有标准浓度的选择剂甲硫氨酸亚砜亚胺 (MSX) 的培养基中发育，但随后在种子培养扩增期间暴露于增加的 MSX 浓度下，实现了 10 –19%。在已经相当优化的过程中观察到该结果。随着培养年龄的增加，用更高的 MSX 浓度扩展细胞可以提高细胞系的生产稳定性。500 升和 1000 升生物反应器中的生产培养物使用 5 升生物反应器复制了实验室结果，证明了过程的稳健性和可扩展性。此外，使用更高 MSX 工艺的最终原料药的产品质量属性与使用标准选择 MSX 浓度在培养基中扩增的细胞的质量属性相当。随后的机理研究证实，细胞在基因水平上的整合谱或基因拷贝数没有改变，谷氨酰胺合成酶、重链或轻链基因的转录水平也没有改变。这项研究提供了一种有效且适用的策略，以提高用于生物制剂制造的治疗性蛋白质的生产力。使用更高 MSX 工艺的最终原料药的产品质量属性与使用标准选择 MSX 浓度在培养基中扩增的细胞的质量属性相当。随后的机理研究证实，细胞在基因水平上的整合谱或基因拷贝数没有改变，谷氨酰胺合成酶、重链或轻链基因的转录水平也没有改变。这项研究提供了一种有效且适用的策略，以提高用于生物制剂制造的治疗性蛋白质的生产力。使用更高 MSX 工艺的最终原料药的产品质量属性与使用标准选择 MSX 浓度在培养基中扩增的细胞的质量属性相当。随后的机理研究证实，细胞在基因水平上的整合谱或基因拷贝数没有改变，谷氨酰胺合成酶、重链或轻链基因的转录水平也没有改变。这项研究提供了一种有效且适用的策略，以提高用于生物制剂制造的治疗性蛋白质的生产力。随后的机理研究证实，细胞在基因水平上的整合谱或基因拷贝数没有改变，谷氨酰胺合成酶、重链或轻链基因的转录水平也没有改变。这项研究提供了一种有效且适用的策略，以提高用于生物制剂制造的治疗性蛋白质的生产力。随后的机理研究证实，细胞在基因水平上的整合谱或基因拷贝数没有改变，谷氨酰胺合成酶、重链或轻链基因的转录水平也没有改变。这项研究提供了一种有效且适用的策略，以提高用于生物制剂制造的治疗性蛋白质的生产力。