当前位置: X-MOL 学术Eur. Biophys. J. › 论文详情
Our official English website, www.x-mol.net, welcomes your feedback! (Note: you will need to create a separate account there.)
A comparison of data quality using quartz vs. sapphire cell windows in analytical ultracentrifugation.
European Biophysics Journal ( IF 2 ) Pub Date : 2020-09-01 , DOI: 10.1007/s00249-020-01454-9
Akash Bhattacharya 1 , Eric Von Seggern 1
Affiliation  

Analytical ultracentrifugation (AUC) cells use either quartz or sapphire windows as end caps for the cell housing. Current generation sapphire windows are not recommended for absorbance data collection below 235 nm, because the window material shows a precipitous drop in transmittance at low wavelengths due to impurities in the sapphire. Quartz windows can be used below 235 nm as they do not exhibit adverse transmittance at low wavelengths. In this study, we demonstrate the optical properties of new generation sapphire windows and compare them to those of quartz windows across a wide range of wavelengths and present the results of sedimentation velocity experiments on BSA using both types of windows using data collected at both the 280 nm absorbance maxima as well as the 230–240 nm (closer to the peptide bond maximum). Our results show that the quartz and new generation sapphire windows deliver identical results in absorbance mode. We also demonstrate that quartz windows suffer significant mechanical deformation while spinning at very high speeds, while sapphire windows do not. This renders Rayleigh interference mode data collected at high speeds using quartz windows much noisier than with sapphire windows—which we have quantified by measuring how the signal to noise ratio of Fourier transformed Rayleigh interference scans degrades at high speed. Thus, we conclude that new-generation sapphire windows can be used for all AUC experiments through almost the entire mid UV range—obviating the need for quartz windows, unless wavelengths below 220 nm must be accessed.



中文翻译:

在分析超速离心中使用石英和蓝宝石晶胞窗口进行数据质量比较。

分析型超速离心(AUC)池使用石英或蓝宝石窗口作为池盖的端盖。不建议使用当前一代的蓝宝石窗口来收集235 nm以下的吸光度数据,因为由于蓝宝石中的杂质,该窗口材料在低波长下会显示出透射率的急剧下降。石英窗口可以在235 nm以下使用,因为它们在低波长下不会显示不利的透射率。在这项研究中,我们演示了新一代蓝宝石窗的光学特性,并将其与宽波长范围内的石英窗的光学特性进行了比较,并介绍了使用两种类型的窗在280处收集的数据在BSA上进行沉降速度实验的结果最大吸光度以及230-240 nm(更接近于肽键的最大值)。我们的结果表明,石英和新一代蓝宝石窗口在吸收模式下可提供相同的结果。我们还证明,石英窗在高速旋转时会遭受明显的机械变形,而蓝宝石窗则不会。这使得使用石英窗高速采集的瑞利干扰模式数据要比使用蓝宝石窗的噪声大得多-我们已经通过测量傅立叶变换瑞利干涉扫描的信噪比如何快速降低来量化。因此,我们得出结论,几乎在整个中紫外范围内,新一代的蓝宝石窗口都可用于所有AUC实验,从而无需使用石英窗口,除非必须进入低于220 nm的波长。我们还证明,石英窗在高速旋转时会遭受明显的机械变形,而蓝宝石窗则不会。这使得使用石英窗高速采集的瑞利干扰模式数据要比使用蓝宝石窗的噪声大得多-我们已经通过测量傅立叶变换瑞利干涉扫描的信噪比如何快速降低来量化。因此,我们得出结论,几乎在整个中紫外范围内,新一代蓝宝石窗口都可用于所有AUC实验,从而无需使用石英窗口,除非必须进入220 nm以下的波长。我们还证明,石英窗在高速旋转时会遭受明显的机械变形,而蓝宝石窗则不会。这使得使用石英窗高速采集的瑞利干扰模式数据要比使用蓝宝石窗的噪声大得多-我们已经通过测量傅立叶变换瑞利干涉扫描的信噪比如何快速降低来量化。因此,我们得出结论,几乎在整个中紫外范围内,新一代的蓝宝石窗口都可用于所有AUC实验,从而无需使用石英窗口,除非必须进入低于220 nm的波长。这使得使用石英窗高速采集的瑞利干扰模式数据要比使用蓝宝石窗的噪声大得多-我们已经通过测量傅立叶变换瑞利干涉扫描的信噪比如何快速降低来量化。因此,我们得出结论,几乎在整个中紫外范围内,新一代的蓝宝石窗口都可用于所有AUC实验,从而无需使用石英窗口,除非必须进入低于220 nm的波长。这使得使用石英窗高速采集的瑞利干扰模式数据要比使用蓝宝石窗的噪声大得多-我们已经通过测量傅立叶变换瑞利干涉扫描的信噪比如何快速降低来量化。因此,我们得出结论,几乎在整个中紫外范围内,新一代蓝宝石窗口都可用于所有AUC实验,从而无需使用石英窗口,除非必须进入220 nm以下的波长。

更新日期:2020-09-01
down
wechat
bug