Investigating plant structure is fundamental in botanical science and provides crucial knowledge for the theories of plant evolution, ecophysiology and for the biotechnological practices. Modern plant anatomy often targets the formation, localization and characterization of cellulosic, lignified or suberized cell walls. While classical methods developed in the 1960s are still popular, recent innovations in tissue preparation, fluorescence staining and microscopy equipment offer advantages to the traditional practices for investigation of the complex lignocellulosic walls. Our goal is to enhance the productivity and quality of microscopy work by focusing on quick and cost-effective preparation of thick sections or plant specimen surfaces and efficient use of direct fluorescent stains. We discuss popular histochemical microscopy techniques for visualization of cell walls, such as autofluorescence or staining with calcofluor, Congo red (CR), fluorol yellow (FY) and safranin, and provide detailed descriptions of our own approaches and protocols. Autofluorescence of lignin in combination with CR and FY staining can clearly differentiate between lignified, suberized and unlignified cell walls in root and stem tissues. Glycerol can serve as an effective clearing medium as well as the carrier of FY for staining of suberin and lipids allowing for observation of thick histological preparations. Three-dimensional (3D) imaging of all cell types together with chemical information by wide-field fluorescence or confocal laser scanning microscopy (CLSM) was achieved.

中文翻译：

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根和茎中木质纤维素和干化细胞壁的直接荧光成像。

植物结构的研究是植物科学的基础，并为植物进化，生态生理学和生物技术实践提供了至关重要的知识。现代植物解剖学通常以纤维素，木质化或干化的细胞壁的形成，定位和表征为目标。尽管在1960年代开发的经典方法仍然很流行，但组织制备，荧光染色和显微镜设备方面的最新创新为传统的实践提供了优势，以研究复杂的木质纤维素壁。我们的目标是通过专注于快速且经济高效地准备厚切片或植物标本表面以及有效利用直接荧光染料来提高显微镜工作的生产率和质量。我们讨论了用于细胞壁可视化的流行组织化学显微镜技术，例如自发荧光或钙荧光，刚果红（CR），荧光黄（FY）和番红花染色，并提供了我们自己的方法和方案的详细说明。木质素的自发荧光与CR和FY染色相结合可以清楚地区分根和茎组织中的木质化，干化和未木质化的细胞壁。甘油可以作为有效的清除介质，也可以作为FY的载体，用于对木脂蛋白和脂质进行染色，从而可以观察到厚厚的组织学制剂。通过宽视野荧光或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）实现了所有细胞类型的三维（3D）成像以及化学信息。刚果红（CR），氟黄（FY）和番红花，并提供我们自己的方法和协议的详细说明。木质素的自发荧光与CR和FY染色相结合可以清楚地区分根和茎组织中的木质化，干化和未木质化的细胞壁。甘油可以作为有效的清除介质，也可以作为FY的载体，用于对木脂蛋白和脂质进行染色，从而可以观察到厚厚的组织学制剂。通过宽视野荧光或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）实现了所有细胞类型的三维（3D）成像以及化学信息。刚果红（CR），氟黄（FY）和番红花，并提供我们自己的方法和协议的详细说明。木质素的自发荧光与CR和FY染色相结合可以清楚地区分根和茎组织中的木质化，干化和未木质化的细胞壁。甘油可以作为有效的清除介质，也可以作为FY的载体，用于对木脂蛋白和脂质进行染色，从而可以观察到厚厚的组织学制剂。通过宽视野荧光或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）实现了所有细胞类型的三维（3D）成像以及化学信息。木质素的自发荧光与CR和FY染色相结合可以清楚地区分根和茎组织中的木质化，干化和未木质化的细胞壁。甘油可以作为有效的清除介质，也可以作为FY的载体，用于对木脂蛋白和脂质进行染色，从而可以观察到厚厚的组织学制剂。通过宽视野荧光或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）实现了所有细胞类型的三维（3D）成像以及化学信息。木质素的自发荧光与CR和FY染色相结合可以清楚地区分根和茎组织中的木质化，干化和未木质化的细胞壁。甘油可以作为有效的清除介质，也可以作为FY的载体，用于对木脂蛋白和脂质进行染色，从而可以观察到厚厚的组织学制剂。通过宽视野荧光或共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）实现了所有细胞类型的三维（3D）成像以及化学信息。