Abstract This study was aimed to evaluate the beneficial effects of reduced glutathione antioxidant in soybean lecithin-based cryopreservation medium on fertility and quality parameters of ram semen. In experiment 1, semen samples were collected from five rams and diluted in the freezing extender contained various concentrations of glutathione as follows: extender without glutathione (G0), extender containing 0.5 mM (G0.5), 1 mM (G1), 2 mM (G2), 4 mM (G4) and 8 mM (G8) glutathione. Motility, membrane functionality, morphology, mitochondrial activity, acrosome integrity, viability, apoptosis status, lipid peroxidation, DNA fragmentation and reactive oxygen species (ROS) concentration were assessed after thawing. In experiment 2, pregnancy, parturition, lambing and twining rates were evaluated after artificial insemination with frozen-thawed semen. In results, G4 showed higher (P ≤ 0.05) total and progressive motility, membrane functionality, acrosome integrity, and lower (P ≤ 0.05) lipid peroxidation and ROS concentration compared to the other groups. Mitochondrial activity and viability were higher (P ≤ 0.05) and late apoptotic-like changes were lower (P ≤ 0.05) in G2 and G4 compared to the other groups. DNA fragmentation and late apoptotic-like changes were higher (P ≤ 0.05) in G8 compared to the other groups. No significant difference was observed among groups in cases of morphology and reproductive performance. In conclusion, supplementation of cryopreservation medium with 4 mM reduced glutathione improves the quality parameters of ram spermatozoa but it was not reflected to the reproductive performance.

中文翻译：

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用谷胱甘肽补充基于大豆卵磷脂的冷冻保存培养基：公羊冻融精液的生育力和流式细胞术研究

摘要 本研究旨在评价基于大豆卵磷脂的冷冻保存培养基中还原型谷胱甘肽抗氧化剂对公羊精液生育力和质量参数的有益影响。在实验 1 中，从 5 只公羊收集精液样品并在含有不同浓度谷胱甘肽的冷冻补充剂中稀释如下：不含谷胱甘肽的补充剂 (G0)、含有 0.5 mM (G0.5)、1 mM (G1)、2 mM 的补充剂(G2)、4 mM (G4) 和 8 mM (G8) 谷胱甘肽。解冻后评估运动性、膜功能、形态、线粒体活性、顶体完整性、活力、细胞凋亡状态、脂质过氧化、DNA 断裂和活性氧 (ROS) 浓度。在实验 2 中，用冻融精液人工授精后，对妊娠、分娩、产羔和双胞胎率进行了评估。结果，与其他组相比，G4 显示出更高 (P ≤ 0.05) 的总和渐进运动、膜功能、顶体完整性以及更低 (P ≤ 0.05) 脂质过氧化和 ROS 浓度。与其他组相比，G2 和 G4 的线粒体活性和活力较高（P ≤ 0.05），晚期凋亡样变化较低（P ≤ 0.05）。与其他组相比，G8 组的 DNA 断裂和晚期凋亡样变化更高（P ≤ 0.05）。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。与其他组相比，膜功能性、顶体完整性以及较低的（P ≤ 0.05）脂质过氧化和 ROS 浓度。与其他组相比，G2 和 G4 的线粒体活性和活力较高（P ≤ 0.05），晚期凋亡样变化较低（P ≤ 0.05）。与其他组相比，G8 组的 DNA 断裂和晚期凋亡样变化更高（P ≤ 0.05）。在形态和繁殖性能方面，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。与其他组相比，膜功能性、顶体完整性以及较低的（P ≤ 0.05）脂质过氧化和 ROS 浓度。与其他组相比，G2 和 G4 的线粒体活性和活力较高（P ≤ 0.05），晚期凋亡样变化较低（P ≤ 0.05）。与其他组相比，G8 组的 DNA 断裂和晚期凋亡样变化更高（P ≤ 0.05）。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。与其他组相比，G2 和 G4 的线粒体活性和活力较高（P ≤ 0.05），晚期凋亡样变化较低（P ≤ 0.05）。与其他组相比，G8 组的 DNA 断裂和晚期凋亡样变化更高（P ≤ 0.05）。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。与其他组相比，G2 和 G4 的线粒体活性和活力较高（P ≤ 0.05），晚期凋亡样变化较低（P ≤ 0.05）。与其他组相比，G8 组的 DNA 断裂和晚期凋亡样变化更高（P ≤ 0.05）。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。在形态和繁殖性能的情况下，组间没有观察到显着差异。总之，在冷冻保存培养基中添加 4 mM 还原型谷胱甘肽可改善公羊精子的质量参数，但并未反映在繁殖性能上。