Idiopathic pulmonary fibrosis (IPF) is a complex lung disease, whose build-up scar tissue is induced by several molecules. Gastrin-releasing peptide (GRP) is released from pulmonary neuroendocrine cells, alveolar macrophages, and some nerve endings in the lung. A possible role of GRP in IPF is unclear. We aimed to investigate the fibrotic response to GRP, at the cellular level in MRC5 and A549 cell lines. The proliferative and fibrotic effects of GRP on these cells were evaluated by using BrdU, immunoblotting, immunofluorescence and qRT-PCR for molecules associated with myofibroblast differentiation, TGF-β and Wnt signalling. All doses of GRP increased the amount of BrdU incorporation in A549 cells. In contrast, the amount of BrdU increased in MRC5 cells in the first 24 h, though progressively decreased by 72 h. GRP did not stimulate epithelial-mesenchymal transition in A549 cells, rather, it stimulated the differentiation of MRC5 cells into myofibroblasts. Furthermore, GRP induced gene and protein expressions of p-Smad2/3 and Smad4, and reduced the levels of Smad7 in MRC5 cells. In addition, GRP decreased Wnt5a protein levels and stimulated β-catenin activation by increasing Wnt4, Wnt7a and β-catenin protein levels. GRP caused myofibroblast differentiation by inducing TGF-βand Wnt pathways via paracrine and autocrine signalling in MRC5 cells. In conclusion, GRP may lead to pulmonary fibrosis due to its proliferative and fibrotic effects on lung fibroblasts. The abrogation of GRP-mediated signal activation might be considered as a treatment modality for fibrotic lung diseases.

中文翻译：

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胃泌素释放肽诱导 MRC5 中的纤维化反应和 A549 中的增殖。

特发性肺纤维化 (IPF) 是一种复杂的肺部疾病，其瘢痕组织由多种分子诱导形成。胃泌素释放肽 (GRP) 从肺神经内分泌细胞、肺泡巨噬细胞和肺中的一些神经末梢释放。GRP 在 IPF 中的可能作用尚不清楚。我们的目的是在 MRC5 和 A549 细胞系的细胞水平上研究对 GRP 的纤维化反应。通过对与肌成纤维细胞分化、TGF-β 和 Wnt 信号传导相关的分子使用 BrdU、免疫印迹、免疫荧光和 qRT-PCR，评估 GRP 对这些细胞的增殖和纤维化作用。所有剂量的 GRP 都增加了 A549 细胞中 BrdU 的掺入量。相比之下，MRC5 细胞中 BrdU 的量在前 24 小时内增加，但在 72 小时后逐渐减少。GRP 不刺激 A549 细胞的上皮间质转化，而是刺激 MRC5 细胞分化为肌成纤维细胞。此外，GRP 诱导 p-Smad2/3 和 Smad4 的基因和蛋白质表达，并降低 MRC5 细胞中 Smad7 的水平。此外，GRP 通过增加 Wnt4、Wnt7a 和 β-catenin 蛋白水平来降低 Wnt5a 蛋白水平并刺激 β-catenin 活化。GRP 通过在 MRC5 细胞中通过旁分泌和自分泌信号传导诱导 TGF-β 和 Wnt 通路引起肌成纤维细胞分化。总之，由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，它可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。它刺激了 MRC5 细胞分化为肌成纤维细胞。此外，GRP 诱导 p-Smad2/3 和 Smad4 的基因和蛋白质表达，并降低 MRC5 细胞中 Smad7 的水平。此外，GRP 通过增加 Wnt4、Wnt7a 和 β-catenin 蛋白水平来降低 Wnt5a 蛋白水平并刺激 β-catenin 活化。GRP 通过在 MRC5 细胞中通过旁分泌和自分泌信号传导诱导 TGF-β 和 Wnt 通路引起肌成纤维细胞分化。总之，由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，它可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。它刺激了 MRC5 细胞分化为肌成纤维细胞。此外，GRP 诱导 p-Smad2/3 和 Smad4 的基因和蛋白质表达，并降低 MRC5 细胞中 Smad7 的水平。此外，GRP 通过增加 Wnt4、Wnt7a 和 β-catenin 蛋白水平来降低 Wnt5a 蛋白水平并刺激 β-catenin 活化。GRP 通过在 MRC5 细胞中通过旁分泌和自分泌信号传导诱导 TGF-β 和 Wnt 通路引起肌成纤维细胞分化。总之，由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，它可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。此外，GRP 通过增加 Wnt4、Wnt7a 和 β-catenin 蛋白水平来降低 Wnt5a 蛋白水平并刺激 β-catenin 活化。GRP 通过在 MRC5 细胞中通过旁分泌和自分泌信号传导诱导 TGF-β 和 Wnt 通路引起肌成纤维细胞分化。总之，由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，它可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。此外，GRP 通过增加 Wnt4、Wnt7a 和 β-catenin 蛋白水平来降低 Wnt5a 蛋白水平并刺激 β-catenin 活化。GRP 通过在 MRC5 细胞中通过旁分泌和自分泌信号传导诱导 TGF-β 和 Wnt 通路引起肌成纤维细胞分化。总之，由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，它可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，GRP 可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。由于 GRP 对肺成纤维细胞的增殖和纤维化作用，GRP 可能导致肺纤维化。取消 GRP 介导的信号激活可能被认为是纤维化肺病的治疗方式。