This study aimed to improve the quality of cryopreserved beef bull (Piedmontese) semen by incorporation of relaxin in diluted semen before cryopreservation procedures. Semen samples were collected from 4 proven fertile bulls, using artificial vagina, once per week for 8 consecutive weeks and pooled together then diluted with Bullxcell® extender, and supplemented with different concentrations of relaxin (0 (control), 25, 50 and 100 ng/ml) before cooling, equilibration and freezing procedures. Frozen semen was thawed and assessed for motility by Computer-Assisted Sperm Analysis and vitality parameters such as acrosome, plasma membrane and DNA integrities, apoptosis, mitochondrial membrane potential, mucus penetration and SOD activity. The developmental potential of bovine embryos produced in vitro by using relaxin-treated was also investigated. In the present study, 50 and 100 ng/ml relaxin incorporation in extended bull semen before cryopreservation induced a reduction of sperm motility immediately after thawing (0h), whereas, during long incubation periods (1-2 h), relaxin showed a significant positive effect on sperm quality by improving the sperm motility and velocity parameters..Interestingly, sperm vitality was improved by 25 and 100 ng/ml relaxin and the blastocyst developmental rate was significantly increased in the 25 ng/ml relaxin group compared with controls (52/118, 44.0% vs. 32/116, 27.6%, respectively). These findings suggest a potential use of relaxin at the doses tested in the present study as an additive in the cryopreservation media of bull semen to improve sperm quality.

中文翻译：

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松弛素对冷冻保存牛精液特性的影响

本研究旨在通过在冷冻保存程序前将松弛素掺入稀释的精液中来提高冷冻保存的牛（皮埃蒙特人）精液的质量。使用人工阴道，每周一次，连续 8 周，从 4 只已证明可育的公牛身上收集精液样本，然后混合在一起，然后用 Bullxcell® 稀释剂稀释，并补充不同浓度的松弛素（0（对照）、25、50 和 100 ng） /ml) 在冷却、平衡和冷冻程序之前。将冷冻精液解冻并通过计算机辅助精子分析和活力参数（例如顶体、质膜和 DNA 完整性、细胞凋亡、线粒体膜电位、粘液渗透和 SOD 活性）评估运动性。还研究了通过使用松弛素处理的体外产生的牛胚胎的发育潜力。在本研究中，冷冻保存前在延长的公牛精液中掺入 50 和 100 ng/ml 松弛素会在解冻后（0 小时）立即引起精子活力降低，而在长潜伏期（1-2 小时）期间，松弛素显示出显着的阳性通过提高精子活力和速度参数对精子质量产生影响。有趣的是，与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组的精子活力提高了 25 ng/ml 和 100 ng/ml 松弛素组，并且囊胚发育率显着增加（52/ 118, 44.0% vs. 32/116, 27.6%)。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。冷冻保存前在延长的公牛精液中掺入 50 和 100 ng/ml 松弛素会在解冻后立即引起精子活力降低（0 小时），而在长潜伏期（1-2 小时）期间，松弛素对精子质量显示出显着的积极影响改善精子活力和速度参数。有趣的是，与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组的精子活力提高了 25 ng/ml 和 100 ng/ml，并且囊胚发育率显着增加（52/118，44.0% vs . 32/116，分别为 27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。冷冻保存前在延长的公牛精液中掺入 50 和 100 ng/ml 松弛素会在解冻后立即引起精子活力降低（0 小时），而在长潜伏期（1-2 小时）期间，松弛素对精子质量显示出显着的积极影响改善精子活力和速度参数。有趣的是，与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组的精子活力提高了 25 ng/ml 和 100 ng/ml，并且囊胚发育率显着增加（52/118，44.0% vs . 32/116，分别为 27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。在较长的潜伏期（1-2 小时）期间，松弛素通过改善精子活力和速度参数对精子质量显示出显着的积极影响。有趣的是，25 和 100 ng/ml 松弛素提高了精子活力，囊胚发育率为与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组中的显着增加（分别为 52/118、44.0% 与 32/116、27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。在较长的潜伏期（1-2 小时）期间，松弛素通过改善精子活力和速度参数对精子质量显示出显着的积极影响。有趣的是，25 和 100 ng/ml 松弛素提高了精子活力，囊胚发育率为与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组中的显着增加（分别为 52/118、44.0% 与 32/116、27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组的精子活力提高了 25 和 100 ng/ml，囊胚发育率显着增加（分别为 52/118、44.0% 和 32/116、27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。与对照组相比，25 ng/ml 松弛素组的精子活力提高了 25 和 100 ng/ml，囊胚发育率显着增加（分别为 52/118、44.0% 和 32/116、27.6%）。这些发现表明，在本研究中测试的剂量下，松弛素可能用作公牛精液冷冻保存介质中的添加剂，以提高精子质量。