Background This study aimed to explore the biological activities of miR-330-3p in dextan sulphate sodium (DSS)-induced ulcerative colitis and apoptosis and the direct target of miR-330-3p in this process. HT-29 cells and male C57BL/6 mice were used to examine the function of miR-330-3p in vitro and in vivo, respectively. Expression of miRNA and mRNA was measured using quantitative real time PCR (qRT-PCR). Western blotting was used to measure the change of protein expression. Flow cytometry was used to determine cell apoptosis and luciferase assay was used to confirm the direct target of miR-330-3p. Results miR-330-3p expression was increased by DSS in both HT-29 cells and mice. Upregulation miR-330-3p induced cell apoptosis, mice weight loss and ulcerative colitis in vivo, which could prevent by suppression of miR-330-3p. Cell apoptosis related protein expression, cleaved caspase-3 and cleaved PARP was also inhibited by miR-330-3p overexpression and elevated by miR-330-3p inhibition both in vitro and in vivo. Luciferase assay confirmed that 3′ untranslated region (3′-UTR) of XBP1 is the directed target of miR-330-3p and Western blotting results have showed that protein expression of XBP1 was decreased by miR-330-3p mimics and increased by miR-330-3p inhibitor. Conclusion miR-330-3p is upregulated by DSS in both HT-29 cells and mice and promoted ulcerative colitis and cell apoptosis by targeting of 3′-UTR of XBP1, which is a key component of ER stress. Inhibition of miR-330-3p prevent DSS-induced ulcerative colitis and cell apoptosis mediated by upregulation of XBP1 expression.

中文翻译：

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抑制 miR-330-3p 通过上调内质网应激成分 XBP1 减轻 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和细胞凋亡

背景 本研究旨在探讨 miR-330-3p 在葡聚糖硫酸钠 (DSS) 诱导的溃疡性结肠炎和细胞凋亡中的生物学活性以及 miR-330-3p 在此过程中的直接靶点。HT-29 细胞和雄性 C57BL/6 小鼠分别用于在体外和体内检查 miR-330-3p 的功能。使用定量实时 PCR (qRT-PCR) 测量 miRNA 和 mRNA 的表达。Western印迹用于测量蛋白质表达的变化。流式细胞术用于测定细胞凋亡，荧光素酶测定用于确认miR-330-3p的直接靶标。结果 在 HT-29 细胞和小鼠中，DSS 均增加了 miR-330-3p 的表达。上调 miR-330-3p 在体内诱导细胞凋亡、小鼠体重减轻和溃疡性结肠炎，这可以通过抑制 miR-330-3p 来预防。细胞凋亡相关蛋白表达、裂解的 caspase-3 和裂解的 PARP 也被 miR-330-3p 过表达抑制，并被 miR-330-3p 抑制在体外和体内升高。荧光素酶测定证实 XBP1 的 3' 非翻译区 (3'-UTR) 是 miR-330-3p 的定向靶标，Western blotting 结果表明 XBP1 的蛋白表达被 miR-330-3p 模拟物降低并被 miR 升高-330-3p 抑制剂。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。裂解的 caspase-3 和裂解的 PARP 也受到 miR-330-3p 过表达的抑制，并通过体外和体内的 miR-330-3p 抑制升高。荧光素酶测定证实 XBP1 的 3' 非翻译区 (3'-UTR) 是 miR-330-3p 的定向靶标，Western blotting 结果表明 XBP1 的蛋白表达被 miR-330-3p 模拟物降低并被 miR 升高-330-3p 抑制剂。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。裂解的 caspase-3 和裂解的 PARP 也受到 miR-330-3p 过表达的抑制，并通过体外和体内的 miR-330-3p 抑制升高。荧光素酶测定证实 XBP1 的 3' 非翻译区 (3'-UTR) 是 miR-330-3p 的定向靶标，Western blotting 结果表明 XBP1 的蛋白表达被 miR-330-3p 模拟物降低并被 miR 升高-330-3p 抑制剂。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。荧光素酶测定证实 XBP1 的 3' 非翻译区 (3'-UTR) 是 miR-330-3p 的定向靶标，Western blotting 结果表明 XBP1 的蛋白表达被 miR-330-3p 模拟物降低并被 miR 升高-330-3p 抑制剂。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。荧光素酶测定证实 XBP1 的 3' 非翻译区 (3'-UTR) 是 miR-330-3p 的定向靶标，Western blotting 结果表明 XBP1 的蛋白表达被 miR-330-3p 模拟物降低并被 miR 升高-330-3p 抑制剂。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。结论 miR-330-3p 在 HT-29 细胞和小鼠中均被 DSS 上调，并通过靶向 XBP1 的 3'-UTR（内质网应激的关键组成部分）促进溃疡性结肠炎和细胞凋亡。抑制 miR-330-3p 可防止 DSS 诱导的溃疡性结肠炎和由 XBP1 表达上调介导的细胞凋亡。