Adoptive T-cell therapy (ACT) using autologous tumor-reactive T lymphocytes has considerable potential for cancer immunotherapy. In ACT, T cells are isolated from cancer patients and then stimulated and expanded in vitro by cytokines and costimulatory molecules. 4-1BB is an important costimulatory protein belonging to the TNF receptor superfamily. It is involved in T-cell survival, proliferation and activation. Agonistic anti-4-1BB monoclonal antibodies have been introduced as appropriate tools for ACT. Here, various single-chain fragment variable (scFv) antibodies were used to activate T cells isolated from peripheral blood via immune magnetic isolation. The T cells were stimulated with IL-2 and anti-CD-3 mAb and then treated with agonistic anti-4-1BB scFvs. The results showed the remarkable effects of anti-41BB scFvs on the functional properties of T cells, including their activation, proliferation and cytokine production. The flow cytometry analysis revealed a considerable increase in the expression of the T-cell activation marker CD69. Moreover, T-cell proliferation was evidenced in treated cells by CFSE labeling compared to the control groups. Anti-4-1BB scFvs significantly increased IFN-γ and IL-2 mRNA and protein expression in T cells, but exhibited no stimulatory effect on IL-4 expression. These findings show that anti-4-1BB scFvs could evoke a Type I immune response. Our results demonstrate that targeting the 4-1BB molecule using agonistic scFvs could be an effective strategy for T-cell stimulation as part of an ACT approach to cancer treatment.

中文翻译：

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通过单链抗体靶向 4-1BB 共刺激分子可促进人类 T 细胞反应。

使用自体肿瘤反应性 T 淋巴细胞的过继性 T 细胞治疗 (ACT) 在癌症免疫治疗方面具有相当大的潜力。在 ACT 中，T 细胞从癌症患者中分离出来，然后通过细胞因子和共刺激分子在体外刺激和扩增。4-1BB 是一种重要的共刺激蛋白，属于 TNF 受体超家族。它参与 T 细胞的存活、增殖和活化。已引入激动性抗 4-1BB 单克隆抗体作为 ACT 的合适工具。在这里，各种单链片段可变 (scFv) 抗体用于激活通过免疫磁分离从外周血中分离的 T 细胞。用 IL-2 和抗 CD-3 mAb 刺激 T 细胞，然后用激动性抗 4-1BB scFv 处理。结果显示抗41BB scFvs对T细胞功能特性的显着影响，包括它们的活化、增殖和细胞因子的产生。流式细胞术分析显示 T 细胞活化标志物 CD69 的表达显着增加。此外，与对照组相比，通过 CFSE 标记在处理过的细胞中证实了 T 细胞增殖。Anti-4-1BB scFvs 显着增加了 T 细胞中 IFN-γ 和 IL-2 mRNA 和蛋白质的表达，但对 IL-4 表达没有刺激作用。这些发现表明，抗 4-1BB scFvs 可以引起 I 型免疫反应。我们的结果表明，使用激动性 scFvs 靶向 4-1BB 分子可能是 T 细胞刺激的有效策略，作为癌症治疗 ACT 方法的一部分。增殖和细胞因子的产生。流式细胞术分析显示 T 细胞活化标志物 CD69 的表达显着增加。此外，与对照组相比，通过 CFSE 标记在处理过的细胞中证实了 T 细胞增殖。Anti-4-1BB scFvs 显着增加了 T 细胞中 IFN-γ 和 IL-2 mRNA 和蛋白质的表达，但对 IL-4 表达没有刺激作用。这些发现表明，抗 4-1BB scFvs 可以引起 I 型免疫反应。我们的结果表明，使用激动性 scFvs 靶向 4-1BB 分子可能是 T 细胞刺激的有效策略，作为癌症治疗 ACT 方法的一部分。增殖和细胞因子的产生。流式细胞术分析显示 T 细胞活化标志物 CD69 的表达显着增加。此外，与对照组相比，通过 CFSE 标记在处理过的细胞中证实了 T 细胞增殖。Anti-4-1BB scFvs 显着增加了 T 细胞中 IFN-γ 和 IL-2 mRNA 和蛋白质的表达，但对 IL-4 表达没有刺激作用。这些发现表明，抗 4-1BB scFvs 可以引起 I 型免疫反应。我们的结果表明，使用激动性 scFvs 靶向 4-1BB 分子可能是 T 细胞刺激的有效策略，作为癌症治疗 ACT 方法的一部分。与对照组相比，通过 CFSE 标记在处理的细胞中证实了 T 细胞增殖。Anti-4-1BB scFvs 显着增加了 T 细胞中 IFN-γ 和 IL-2 mRNA 和蛋白质的表达，但对 IL-4 表达没有刺激作用。这些发现表明，抗 4-1BB scFvs 可以引起 I 型免疫反应。我们的结果表明，使用激动性 scFvs 靶向 4-1BB 分子可能是 T 细胞刺激的有效策略，作为癌症治疗 ACT 方法的一部分。与对照组相比，通过 CFSE 标记在处理的细胞中证实了 T 细胞增殖。Anti-4-1BB scFvs 显着增加了 T 细胞中 IFN-γ 和 IL-2 mRNA 和蛋白质的表达，但对 IL-4 表达没有刺激作用。这些发现表明，抗 4-1BB scFvs 可以引起 I 型免疫反应。我们的结果表明，使用激动性 scFvs 靶向 4-1BB 分子可能是 T 细胞刺激的有效策略，作为癌症治疗 ACT 方法的一部分。