MicroRNA‐214 (miR‐214), a pivotal tumour‐suppressive miRNA, is downregulated in canine hemangiosarcoma (HSA) cells. Although these tumour‐suppressive miRNAs are potential therapeutic agents, their clinical efficacy may be limited because of their vulnerability to RNase‐rich microenvironments and low in vivo transfection rates. We developed synthetic miR‐214s with enhanced cytotoxicity, RNase resistance and quantity of miR‐214 in/on cells. These synthetic miR‐214s were synthesized by various chemical modifications (such as 4′‐aminoethyl‐2′‐fluoro, 2′‐fluoro, 2′‐O‐methyl, phosphorothioate and oligospermine modifications) of the wild‐type mature miR‐214 sequences. Transfection of HSA cells with synthetic miR‐214 (miR‐214 5AE) demonstrated significant growth suppressive effect and induced the strongest apoptotic response. Synthetic miR‐214s (miR‐214 5AE, miR‐214 10AE and miR‐214 OS) were much more stable than mature miR‐214s in foetal bovine serum. Similar to mature miR‐214, 5AE and OS suppressed the expression level of COP1 in HSA cells. The quantity of synthetic miR‐214s in/on cells was higher than that of mature miR‐214. In conclusion, we developed a clinically applicable, synthetic miR‐214 5AE that regulates the COP1 protein expression similar to that mediated by mature miR‐214. Additionally, miR‐214 5AE confers better cytotoxicity, nuclease resistance and transfection rate than mature miR‐214. Thus, miR‐214 5AE could potentially be a novel miRNA‐based chemotherapeutic agent that could improve the prognosis of HSA. Its in vivo effects on canine HSA need to be examined in future.

中文翻译：

---

用于治疗犬血管肉瘤的合成 microRNA-214 的开发显示出增强的细胞毒性和 RNase 抗性。

MicroRNA-214 (miR-214) 是一种关键的肿瘤抑制 miRNA，在犬血管肉瘤 (HSA) 细胞中下调。尽管这些抑制肿瘤的 miRNA 是潜在的治疗药物，但由于它们对富含 RNase 的微环境的脆弱性和体内转染率低，它们的临床疗效可能受到限制。我们开发了合成的 miR-214s，具有增强的细胞毒性、RNase 抗性和 miR-214 细胞内/细胞上的数量。这些合成的 miR-214s 是通过野生型成熟 miR-214 的各种化学修饰（例如 4'-氨基乙基-2'-氟、2'-氟、2'-O-甲基、硫代磷酸酯和寡精胺修饰）合成的。序列。用合成的 miR-214 (miR-214 5AE) 转染 HSA 细胞表现出显着的生长抑制作用并诱导最强的凋亡反应。合成的 miR-214s（miR-214 5AE、miR-214 10AE 和 miR-214 OS）在胎牛血清中比成熟的 miR-214s 稳定得多。与成熟的 miR-214 类似，5AE 和 OS 抑制了 HSA 细胞中 COP1 的表达水平。细胞内/细胞上合成的 miR-214s 的数量高于成熟的 miR-214。总之，我们开发了一种临床适用的合成 miR-214 5AE，其调节 COP1 蛋白表达类似于成熟 miR-214 介导的表达。此外，与成熟的 miR-214 相比，miR-214 5AE 具有更好的细胞毒性、核酸酶抗性和转染率。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。miR-214 10AE 和 miR-214 OS) 在胎牛血清中比成熟的 miR-214s 稳定得多。与成熟的 miR-214 类似，5AE 和 OS 抑制了 HSA 细胞中 COP1 的表达水平。细胞内/细胞上合成的 miR-214s 的数量高于成熟的 miR-214。总之，我们开发了一种临床适用的合成 miR-214 5AE，可调节 COP1 蛋白表达，类似于成熟 miR-214 介导的表达。此外，与成熟的 miR-214 相比，miR-214 5AE 具有更好的细胞毒性、核酸酶抗性和转染率。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。miR-214 10AE 和 miR-214 OS) 在胎牛血清中比成熟的 miR-214s 稳定得多。与成熟的 miR-214 类似，5AE 和 OS 抑制了 HSA 细胞中 COP1 的表达水平。细胞内/细胞上合成的 miR-214s 的数量高于成熟的 miR-214。总之，我们开发了一种临床适用的合成 miR-214 5AE，可调节 COP1 蛋白表达，类似于成熟 miR-214 介导的表达。此外，与成熟的 miR-214 相比，miR-214 5AE 具有更好的细胞毒性、核酸酶抗性和转染率。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。细胞内/细胞上合成的 miR-214s 的数量高于成熟的 miR-214。总之，我们开发了一种临床适用的合成 miR-214 5AE，可调节 COP1 蛋白表达，类似于成熟 miR-214 介导的表达。此外，与成熟的 miR-214 相比，miR-214 5AE 具有更好的细胞毒性、核酸酶抗性和转染率。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。细胞内/细胞上合成的 miR-214s 的数量高于成熟的 miR-214。总之，我们开发了一种临床适用的合成 miR-214 5AE，可调节 COP1 蛋白表达，类似于成熟 miR-214 介导的表达。此外，与成熟的 miR-214 相比，miR-214 5AE 具有更好的细胞毒性、核酸酶抗性和转染率。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。核酸酶抗性和转染率高于成熟的 miR-214。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。核酸酶抗性和转染率高于成熟的 miR-214。因此，miR-214 5AE 可能是一种新型的基于 miRNA 的化疗药物，可以改善 HSA 的预后。它对犬 HSA 的体内影响需要在未来进行检查。