当前位置:
X-MOL 学术
›
Dev. Growth Differ.
›
论文详情
Our official English website, www.x-mol.net, welcomes your feedback! (Note: you will need to create a separate account there.)
Identification of transgene integration site and anatomical properties of fluorescence intensity in a EGFP transgenic chicken line.
Development, Growth & Differentiation ( IF 2.5 ) Pub Date : 2019-10-15 , DOI: 10.1111/dgd.12631 Kaori Tsujino 1 , Yuya Okuzaki 2 , Nobuyuki Hibino 1 , Kazuki Kawamura 1 , Seiji Saito 1 , Yumi Ozaki 3 , Satoshi Ishishita 3 , Atsushi Kuroiwa 1 , Shinji Iijima 2 , Yoichi Matsuda 3 , Kenichi Nishijima 2 , Takayuki Suzuki 3
Development, Growth & Differentiation ( IF 2.5 ) Pub Date : 2019-10-15 , DOI: 10.1111/dgd.12631 Kaori Tsujino 1 , Yuya Okuzaki 2 , Nobuyuki Hibino 1 , Kazuki Kawamura 1 , Seiji Saito 1 , Yumi Ozaki 3 , Satoshi Ishishita 3 , Atsushi Kuroiwa 1 , Shinji Iijima 2 , Yoichi Matsuda 3 , Kenichi Nishijima 2 , Takayuki Suzuki 3
Affiliation
Transgenic birds are commonly used for time-lapse imaging and fate mapping studies in developmental biology. When researchers use transgenic birds expressing fluorescent protein, they need to understand the integration site of the transgene in the genome and the intensity of fluorescence in the tissues of interest. In this study, we determined the integration site of the transgene and fluorescence property of developing organs in our transgenic chicken line generated by lentivirus infection. The transgene was localized between exons 3 and 4 of MED27. Some homozygotes and heterozygotes appeared to be lethal at early embryonic stages. We performed histological analysis of EGFP expression in transgenic embryos at St. 14, 17, and 24 by immunohistochemistry with anti-GFP antibody on paraffin sections. Next, we cut cryosections and quantified direct EGFP intensity from the transgene in each tissue without performing immunohistochemistry. These results revealed that EGFP intensity in each tissue was unique in developing embryos and changed according to developmental stages. Finally, we demonstrated that EGFP-expressing cells in a micromass culture with co-culturing wild-type cells were clearly distinguishable via live cell imaging. These results provide essential information on the potential of our transgenic line and indicate that these transgenic chicken lines are useful for research associated with developmental biology.
中文翻译:
EGFP转基因鸡品系中转基因整合位点的鉴定和荧光强度的解剖特征。
转基因鸟类通常用于发育生物学中的延时成像和命运定位研究。当研究人员使用表达荧光蛋白的转基因鸟类时,他们需要了解基因组中转基因的整合位点以及感兴趣的组织中的荧光强度。在这项研究中,我们确定了慢病毒感染产生的转基因鸡品系中转基因的整合位点和发育器官的荧光特性。转基因位于MED27的外显子3和4之间。一些纯合子和杂合子在早期胚胎阶段似乎具有致死性。我们通过在石蜡切片上用抗GFP抗体进行的免疫组织化学对St.14、17和24的转基因胚胎中EGFP表达进行了组织学分析。下一个,我们在不进行免疫组织化学的情况下,切开冰冻切片并量化了每个组织中转基因的直接EGFP强度。这些结果表明,每个组织中的EGFP强度在发育中的胚胎中是独特的,并且根据发育阶段而改变。最后,我们证明了通过活细胞成像可以清楚地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。我们证明,通过活细胞成像可清楚地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。我们证明,通过活细胞成像可以清晰地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。
更新日期:2019-11-01
中文翻译:
EGFP转基因鸡品系中转基因整合位点的鉴定和荧光强度的解剖特征。
转基因鸟类通常用于发育生物学中的延时成像和命运定位研究。当研究人员使用表达荧光蛋白的转基因鸟类时,他们需要了解基因组中转基因的整合位点以及感兴趣的组织中的荧光强度。在这项研究中,我们确定了慢病毒感染产生的转基因鸡品系中转基因的整合位点和发育器官的荧光特性。转基因位于MED27的外显子3和4之间。一些纯合子和杂合子在早期胚胎阶段似乎具有致死性。我们通过在石蜡切片上用抗GFP抗体进行的免疫组织化学对St.14、17和24的转基因胚胎中EGFP表达进行了组织学分析。下一个,我们在不进行免疫组织化学的情况下,切开冰冻切片并量化了每个组织中转基因的直接EGFP强度。这些结果表明,每个组织中的EGFP强度在发育中的胚胎中是独特的,并且根据发育阶段而改变。最后,我们证明了通过活细胞成像可以清楚地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。我们证明,通过活细胞成像可清楚地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。我们证明,通过活细胞成像可以清晰地区分与共培养野生型细胞一起在微团培养中表达EGFP的细胞。这些结果提供了有关我们转基因品系潜力的重要信息,并表明这些转基因鸡品系可用于与发育生物学相关的研究。