One biofabrication process that has gained tremendous momentum in the field of tissue engineering and regenerative medicine is cell-printing or most commonly bioprinting. We have shown that thermal inkjet bioprinted human microvascular endothelial cells were recruited or otherwise involved in the formation of microvasculature to form graft-host anastomoses upon implantation. The present study aims to quantify and characterize the expression and activation of specific cytokines and kinases in vitro. Morphological characteristics demonstrate elongated protrusions of TIB-HMVECs at 5-6 times the size of manually pipetted cells. Moreover, annexin V-FITC and propidium iodide apoptosis assay via flow cytometry demonstrated a 75% apoptosis among printed cells as compared to among control cells. Cell viability at a 3 d incubation period was significantly higher for printed cells as compared to control. Milliplex magnetic bead panels confirmed significant overexpression of HSP70, IL-1α, VEGF-A, IL-8, and FGF-1 of printed cells compared to control. In addition, a Human phospho-kinase array displayed a significant over activation of the heat-shock proteins HSP27 and HSP60 of printed cells compared to the manually seeded cells. Collectively, it is suggested that the massive appearance of capillary blood vessels upon implantation that has been reported elsewhere may be due to the activation of the HSP-NF-κB pathway to produce VEGF. This cell activation may be used as a new strategy for vascularization of tissue engineered constructs which are in high demand in regenerative medicine applications.

中文翻译：

---

热喷墨生物打印在体外触发人微血管内皮细胞中VEGF途径的激活。

在组织工程和再生医学领域中获得巨大发展动力的一种生物制造工艺是细胞印刷或最常见的生物印刷。我们已经表明，热喷墨生物打印的人微血管内皮细胞被募集或以其他方式参与微脉管系统的形成，以在植入时形成移植物宿主吻合。本研究旨在量化和表征特定细胞因子和激酶在体外的表达和激活。形态特征表明，TIB-HMVEC的伸长突起是手动移液细胞大小的5-6倍。此外，通过流式细胞术进行的膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶凋亡测定表明，与对照细胞相比，印刷细胞中的凋亡为75％。与对照相比，印刷细胞在3 d孵育期的细胞活力明显更高。Milliplex磁珠板证实了与对照组相比，印刷细胞的HSP70，IL-1α，VEGF-A，IL-8和FGF-1明显过表达。另外，与人工接种的细胞相比，人磷酸激酶阵列显示出打印细胞的热休克蛋白HSP27和HSP60的显着过度活化。总体而言，建议在其他地方报道的植入时毛细血管的大量出现可能是由于激活HSP-NF-κB途径产生VEGF所致。这种细胞活化可以用作组织工程构建体的血管化的新策略，该组织工程构建体在再生医学应用中非常需要。Milliplex磁珠板证实了与对照组相比，印刷细胞的HSP70，IL-1α，VEGF-A，IL-8和FGF-1明显过表达。另外，与人工接种的细胞相比，人磷酸激酶阵列显示出打印细胞的热休克蛋白HSP27和HSP60的显着过度活化。总体而言，建议在其他地方报道的植入时毛细血管的大量出现可能是由于激活HSP-NF-κB途径产生VEGF所致。这种细胞活化可以用作组织工程构建体的血管化的新策略，该组织工程构建体在再生医学应用中非常需要。与对照组相比，Milliplex磁珠板证实了HSP70，IL-1α，VEGF-A，IL-8和FGF-1明显过表达。另外，与人工接种的细胞相比，人磷酸激酶阵列显示出打印细胞的热休克蛋白HSP27和HSP60的显着过度活化。总体而言，建议在其他地方报道的植入时毛细血管的大量出现可能是由于激活HSP-NF-κB途径产生VEGF所致。这种细胞活化可以用作组织工程化构建体的血管化的新策略，其在再生医学应用中非常需要。与人工接种的细胞相比，人类磷酸激酶阵列显示出打印细胞的热休克蛋白HSP27和HSP60的显着过度活化。总体而言，建议在其他地方报道的植入时毛细血管的大量出现可能是由于激活HSP-NF-κB途径产生VEGF所致。这种细胞活化可以用作组织工程构建体的血管化的新策略，该组织工程构建体在再生医学应用中非常需要。与人工接种的细胞相比，人类磷酸激酶阵列显示出打印细胞的热休克蛋白HSP27和HSP60的显着过度活化。总体而言，建议在其他地方报道的植入时毛细血管的大量出现可能是由于激活HSP-NF-κB途径产生VEGF所致。这种细胞活化可以用作组织工程化构建体的血管化的新策略，其在再生医学应用中非常需要。提示在其他地方已经报道了植入后毛细血管的大量出现可能是由于HSP-NF-κB途径的激活产生了VEGF。这种细胞活化可以用作组织工程构建体的血管化的新策略，该组织工程构建体在再生医学应用中非常需要。提示在其他地方已经报道了植入后毛细血管的大量出现可能是由于HSP-NF-κB途径的激活产生了VEGF。这种细胞活化可以用作组织工程构建体的血管化的新策略，该组织工程构建体在再生医学应用中非常需要。