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Regulating temperature and relative humidity in air-liquid interface in vitro systems eliminates cytotoxicity resulting from control air exposures.
Toxicology Research ( IF 2.1 ) Pub Date : 2017-05-23 , DOI: 10.1039/c7tx00109f Jose Zavala 1 , Rebecca Greenan 2 , Q Todd Krantz 1 , David M DeMarini 1 , Mark Higuchi 1 , M Ian Gilmour 1 , Paul A White 2
Toxicology Research ( IF 2.1 ) Pub Date : 2017-05-23 , DOI: 10.1039/c7tx00109f Jose Zavala 1 , Rebecca Greenan 2 , Q Todd Krantz 1 , David M DeMarini 1 , Mark Higuchi 1 , M Ian Gilmour 1 , Paul A White 2
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VITROCELL® systems permit cell exposures at the air-liquid interface (ALI); however, there are inconsistent methodologies in the literature for their operation. Some studies find that exposure to air (vehicle control) induced cytotoxicity relative to incubator controls; others do not mention if any cytotoxicity was encountered. We sought to test whether temperature and relative humidity (temp/RH) influence cytotoxicity with an unmodified (conditions A & B) and modified (condition C) VITROCELL® 6 CF with temp/RH controls to permit conditioning of the sampled air-flow. We exposed BEAS-2B cells for 1 h to air and measured viability (WST-1 cell proliferation assay) and lactate dehydrogenase (LDH) release 6 h post-exposure. Relative to controls, cells exposed to air at (A) 22 °C and 18% RH had a 47.9% ± 3.2% (p < 0.0001) reduction in cell viability and 10.7% ± 2.0% (p < 0.0001) increase in LDH release (B) 22 °C and 55% RH had a 40.3% ± 5.8% (p < 0.0001) reduction in cell viability and 2.6% ± 2.0% (p = 0.2056) increase in LDH release, or (C) 37 °C and >75% RH showed no changes in cell viability and no increase in LDH release. Furthermore, cells exposed to air at 37 °C and >75% RH 24 h post-exposure showed no changes in viability or LDH release relative to incubator controls. Thus, reductions in cell viability were induced under conditions used typically in the literature (conditions A & B). However, our modifications (condition C) overcome this shortcoming by preventing cell desiccation; regulating temp/RH is essential for conducting adequate ALI exposures.
中文翻译：
在体外系统中调节气液界面的温度和相对湿度可消除由于暴露于控制空气中而产生的细胞毒性。
VITROCELL®系统允许细胞在气液界面（ALI）处暴露；但是，文献中的操作方法不一致。一些研究发现，暴露于空气（车辆控制）相对于培养箱控制会诱导细胞毒性。其他人没有提及是否遇到任何细胞毒性。我们试图测试温度和相对湿度（temp / RH）是否通过未修饰的（条件A和B）和修饰的（条件C）VITROCELL®6 CF带有温度/ RH控件来调节所采样的气流，从而影响细胞毒性。我们将BEAS-2B细胞暴露于空气中1小时，并在暴露后6小时测量活力（WST-1细胞增殖测定）和乳酸脱氢酶（LDH）释放。相对于对照，暴露于（A）22°C和18％RH的空气中的细胞具有47.9％±3.2％（p <0。0001）细胞活力降低和LDH释放增加10.7％±2.0％（p <0.0001）（B）22°C和55％RH时细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001）和2.6％ LDH释放增加±2.0％（p = 0.2056），或（C）37°C和> 75％RH表明细胞活力无变化，LDH释放也无增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。0001）LDH释放增加（B）22°C和55％RH，细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001），LDH释放增加2.6％±2.0％（p = 0.2056），或（ C）在37°C和> 75％RH的条件下，细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。0001）LDH释放增加（B）22°C和55％RH，细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001），LDH释放增加2.6％±2.0％（p = 0.2056），或（ C）在37°C和> 75％RH的条件下，细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，细胞在暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中，相对于培养箱对照，其生存力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。75％RH显示细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。75％RH显示细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。
更新日期：2017-05-23
中文翻译：
在体外系统中调节气液界面的温度和相对湿度可消除由于暴露于控制空气中而产生的细胞毒性。
VITROCELL®系统允许细胞在气液界面（ALI）处暴露；但是，文献中的操作方法不一致。一些研究发现，暴露于空气（车辆控制）相对于培养箱控制会诱导细胞毒性。其他人没有提及是否遇到任何细胞毒性。我们试图测试温度和相对湿度（temp / RH）是否通过未修饰的（条件A和B）和修饰的（条件C）VITROCELL®6 CF带有温度/ RH控件来调节所采样的气流，从而影响细胞毒性。我们将BEAS-2B细胞暴露于空气中1小时，并在暴露后6小时测量活力（WST-1细胞增殖测定）和乳酸脱氢酶（LDH）释放。相对于对照，暴露于（A）22°C和18％RH的空气中的细胞具有47.9％±3.2％（p <0。0001）细胞活力降低和LDH释放增加10.7％±2.0％（p <0.0001）（B）22°C和55％RH时细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001）和2.6％ LDH释放增加±2.0％（p = 0.2056），或（C）37°C和> 75％RH表明细胞活力无变化，LDH释放也无增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。0001）LDH释放增加（B）22°C和55％RH，细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001），LDH释放增加2.6％±2.0％（p = 0.2056），或（ C）在37°C和> 75％RH的条件下，细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。0001）LDH释放增加（B）22°C和55％RH，细胞活力降低40.3％±5.8％（p <0.0001），LDH释放增加2.6％±2.0％（p = 0.2056），或（ C）在37°C和> 75％RH的条件下，细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，细胞在暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中，相对于培养箱对照，其生存力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。75％RH显示细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。75％RH显示细胞活力没有变化，LDH释放也没有增加。此外，相对于培养箱对照，暴露后24小时暴露于37°C和> 75％RH的空气中的细胞显示活力或LDH释放没有变化。因此，在文献中通常使用的条件（条件A和B）下诱导细胞活力的降低。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥克服了该缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。然而，我们的修改（条件C）通过防止细胞干燥而克服了这一缺点。调节温度/相对湿度对于进行足够的ALI暴露至关重要。
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