乳腺癌是世界上妇女发病率最高的癌症，严重威胁着妇女的健康。紫杉醇(Paclitaxel，PTX)、甲氨蝶呤(Methotrexate，MTX)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil，5-FU)作为常用的化疗药物，可单独或联合用于乳腺癌的治疗。PTX是一种小分子抗肿瘤药物，通过与β-微管蛋白的相互作用，引起微管蛋白聚合，破坏细胞分裂，最终诱导细胞凋亡。MTX是一种与叶酸结构相似的拮抗剂，可破坏叶酸转化为四氢叶酸的途径，抑制嘌呤和嘧啶的生成。5-FU是一种嘧啶拮抗剂，其活性代谢物干扰胸腺苷酸合成酶的活性，阻碍DNA或RNA的复制和转录。然而，化疗药物在临床治疗中存在诸多弊端。首先，化疗药物存在许多副作用，如周围神经病变、粘膜炎、肝毒性以及骨髓抑制等。其次，化疗药物具有治疗窗口窄，代谢快，以及个体间药代动力学差异大等缺点。因此，测定PTX、MTX和5-FU的浓度对乳腺癌治疗至关重要，有助于个体化治疗方案的制定，从而提高疗效和耐受性，降低副作用的发生概率。

通过PTX-1- KLH和DTX-1-BSA的异源组合筛选到PTX的高灵敏和高特异性的单克隆抗体2F10，通过MTX-KLH和MTX-BSA的组合获得MTX的单克隆抗体1A2。随后，基于PTX、MTX和5-FU的单克隆抗体开发了一种同时检测这三种目标物的胶体金免疫层析传感器，并用于血浆和尿液样本的检测。其中，对于PTX和MTX的实际血浆样本，该方法的检测结果与LC-MS/MS结果相关性良好，满足临床检测的需要。因此，本研究建立的金标多重免疫层析试纸条可作为临床检测PTX、MTX和5-FU的潜在工具。

图1金标多重免疫层析试纸条的(a)结构图和(b)检测原理。

图2半抗原的化学结构和抗原的合成路线：（a）PTX-1-KLH，（b）DTX-1-BSA，（c）MTX-KLH、（d）DAMPA-BSA、（e）5-FU以及（f）5-FU-1-BSA。

图3（a）单克隆抗体的亚型，（b）单克隆抗体 2F10和（c）单克隆抗体1A2的亲和力曲线，以及（d）单克隆抗体 2F10和（e）单克隆抗体1A2的标准曲线。

图4 血浆（a）和尿液（c）样本中PTX、MTX和5-FU的多重免疫层析试纸条检测结果，以及血浆（b）和尿液样本的标准曲线（d）。

胥传来教授研究团队30多年来一直致力于小分子化合物的单克隆抗体制备与免疫分析检测关键技术研究。系统开展了小分子抗原表位设计与修饰，提出了基质效应增强的高滴度单克隆抗体制备技术，建成了国内外最大的小分子单克隆抗体资源库，以污染物快速甄别与现场检测为主线，研发了系列免疫快速检测试纸条、试剂盒、亲和层析柱、免疫磁珠以及快速定量检测试剂与仪器，广泛应用于食品、粮食、农产品、化妆品、环境中等风险因子的日常监测。

Jiang X, Qu A, Xu X, et al. A gold-based multiplex immunochromatographic sensor for detecting paclitaxel, methotrexate, and 5-fluorouracil in clinical samples. Nano Research, 2024, https://doi.org/10.1007/s12274-024-6649-7. 

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