药物诱导的肝损伤（DILI）是目前已上市药物下架的主要原因之一。由于缺乏DILI致病机制的充分研究，临床诊断DILI依然存在较大挑战。目前DILI的确诊主要通过严格排除其他相关肝脏疾病后，通过停药评估肝功能是否恢复来判断。因此，亟需发展新型的DILI相关生物标志物来实现DILI的精确诊断。
近日，我们团队通过开发光谱可区分的同时用于高尔基体与线粒体HNO成像的两种荧光探针Golgi-HNO与Mito-HNO（图1），实现了DILI的准确诊断。其中Golgi-HNO探针是由牛血清蛋白（BSA）和Fluo-HNO组成，牛血清蛋白是高尔基体的靶向基团，Fluo-HNO是识别HNO特异性荧光探针，它以荧光素为荧光团，2-（二苯膦基）苯甲酸酯为反应位点。Mito-HNO由苯并花菁作为荧光团，2-(二苯膦基)苯甲酸酯为反应位点。HNO与2-（二苯膦基）苯甲酸酯反应后生成相应的氮杂鎓盐。探针的酯键被破坏释放出羟基，由于分子内电荷转移使探针荧光恢复。Golgi-HNO探针的激发发射波长为480 nm/520 nm，Mito-HNO探针的激发发射波长为695 nm/725 nm。Golgi-HNO探针具有良好的高尔基体定位能力，而Mito-HNO探针具有良好的线粒体定位能力，且二者可同时用于细胞内成像。利用Golgi-HNO和Mito-HNO，我们成功地观察到在DILI过程中高尔基体和线粒体中内源性HNO的水平显著增加。此外，通过这两种探针在活体中的可视化分析，我们验证了DILI小鼠肝脏中HNO的水平增加，并且可以通过检测HNO来诊断DILI。该研究为揭示高尔基体和线粒体中HNO的水平提供了有力的工具，并为DILI的诊断提供了双重保障。
